109is réunion de la société belge de biologie (138) 



Le dosage du Bactériophage. 

 Note de R. Appelmans, présentée par R. Bruynoghe. 



Dans une note publiée à la Société de' biologie le 29 novembre 

 1919, d'Ilérelle a indiqué une méthode de dosage du Bactério- 

 phage. Il met dans 10 ce. d'une émulsion contenant environ 200 

 millions de microbes par ce. i/5o.ooo de ce de Bactériophage 

 et de ce mélange il étale une anse (soit i/ioo de ce) sur un tube 

 de gélose inclinée. îl compte alors le nombre de plages de dissolu- 

 tion et estime d'après cela le nombre d'ultramicrobes. En effet le 

 Bactériophage n'agit pas à linstar dun liquide, en exerçant sur 

 toute la surface d'ensemencement la même action ; la lyse ne se 

 produit qu'aux endroits où un ultramicrobe a été déposé sur la 

 g-élose. 



Cette méthode est toutefois d'une exécution plutôt difficile parce" 

 que les plages de clarification peuvent être extrêmement peu 

 étendues et de ce fait peu apparentes. Ajoutons à cela que, quand 

 elles sont quelque peu vastes, on pourrait supposer que certaines 

 d'entre elles résultent d'un manque d'ensemencement à ce niveau. 



Nous avons essayé pour le dosage le procédé des dilutions suc- 

 cessives préconisé par Miquel pour l'analyse de l'eau. A cet effet 

 nous introduisons, dans des tubes ensemencés avec le microbe 

 apte à subir la lyse, des quantités décroissantes de Bactériophage 

 i/io, i/'ioo, I 1000, jusqu'à 1 /i. 000. 000. 000. 000, d'après que le 

 microbe a un développement normal ou subit la lyse immédiate 

 ou ultérieure nous admettons la présence ou l'absence du Bacté- 

 ïiophage en question. 



Quand nous dosons le Bactériophage provenant de tubes, ense- 

 mencés avec le même nombre de gouttes de Bactériophage et le 

 même nombre de gouttes de culture, nous constatons de part 

 et d'autre la même activité. Il arrive toutefois de temps en temps 

 qu'une dilution donnée fournit un ensemencement négatif quant 

 au Bactériophage, alors que la dilution dix fois plus forte en con- 

 tient encore. Ceci s'explique assez bien avec la notion de Bacté- 

 riophage supposé un être vivant. On observe d'ailleurs des faits 

 analogues dans la numération des germes de l'eau en utilisant la 

 méthode de Miquel. 



Cette technique nous a permis de faire les constatations sui- 

 vantes : 



I. Le Bactériophage introduit dans du bouillon ensemencé avec 

 des microbes lysables, y augmente quantitativement pendant le 

 séjour à l'étuv^. Cette augmentation est sensiblement la même 

 pour un Bactériophage et une culture donnée, que l'ensemence- 



