﻿Mikroskopische Befunde bei Arthritis deformans. 121 



den Schnitten osteomalacischer Knochen, welche vor der Entkalkung nur in Alkohol lagen, und noch mehr an Schnitten 

 solcher Knochen, welche im entkalkten Zustand längere Zeit in Alkohol aufbewahrt waren, nur kurze Zeit, wird sehr 

 bald undeutlich, diffus oder wird sogar schon gleich bei Beginn der Farbstoffeinwirkung durch eine intensivere 

 Tingierung der bereits vor der Entkalkung kalklos gewesenen Knochenpartien vertreten.« 



Auch zur Ausprobung dieser Anilinfarbstoffmethoden wurden von mir zu Beginn dieser Unter- 

 suchungen, unter Mitwirkung des Präparators am hiesigen pathologisch-anatomischen Institute N. BOCK, 

 eigene vergleichende Untersuchungen an osteomalacischen und rachitischen Knochen angestellt, 

 und zwar in Kombination mit verschiedenen der modernen technischen Verfahren. 



Zu diesen Versuchen wurden sowohl Knochen verwendet, die nach Vorbehandlung mit MÜLLER'- 

 scher Flüssigkeit, als auch ohne diese, nach vorausgehender Aufbewahrung in Alkohol oder auch in 

 Formalin mittels v. EBNER's Methode entkalkt waren, und es kam dabei nicht nur Zerlegung in Gefrier- 

 mikrotomschnitte, sondern auch (zwecks Anfertigung großer Übersichtsschnitte) Celloidin-Einbettung der 

 nach v. EBNER entkalkten Knochenstücke zur Anwendung. 



Auch durch das letztere Verfahren wurde der Erfolg der versuchten Färbungsmethoden nicht beein- 

 trächtigt, sofern das Celloidin vor Anwendung der Anilinfarbstofflösungen mittels Äther-Alkohol entzogen 

 wird, da es sich sonst ja intensiv mitfärbt. 



Die Bemühungen waren dabei daraufgerichtet, das Celloidin in schonendster Weise aus den Schnitten zu entfernen, was 

 am besten gelingt, wenn man die Celloidinschnitte durch vorherige stufenweise Übertragung in 700/ , 95%, dann in absoluten 

 Alkohol zur Celloidinauflösung in Äther-Alkohol vorbereitet und sie aus diesem wieder in die verschiedenprozentigen Alkohole, aber 

 in umgekehrter Reihenfolge, zurückgibt. 



Dieser Behandlung kann überdies mit großem Nutzen die Aufklebung der Celloidinschnitte auf die 

 Objektträger nach dem Verfahren von OLT (100) unter Anwendung von Phenolgelatine und 10% Formalin 

 vorausgeschickt werden. 



Als Ergebnis aller dieser Versuche ist anzuführen, daß die Anwendung der genannten Anilin- 

 farbstofflösungen zu demselben Erfolg führte, ob die Schnitte von in Formalin oder in MÜLLER'scher 

 Flüssigkeit aufbewahrten Knochen herrührten, wenn sie nur in EBNER'scher Flüssigkeit vollständig 

 entkalkt worden waren. Die vor der Entkalkung kalkhaltig gewesenen Knochenteile färbten sich intensiv, 

 die bereits vor der Entkalkung kalklos gewesenen Knochengebiete blieben ungefärbt (wobei selbst- 

 verständlich das Bild der Knochenstruktur, im besonderen ihr fibrillärer Aufbau ungeändert deutlich ist, 

 wie dies ja der Entkalkung mittels des v. EBNER'schen Verfahrens entspricht). 



Umgekehrt fiel die Färbung aus, das heißt es nahmen die von vornherein und schon vor der 

 Entkalkung kalklos gewesenen Teile des Knochens die genannten Anilinfarbstoffe an, während die 

 kalkhaltig gewesenen Gebiete ungefärbt blieben, wenn die Objekte, wie schon unter Anführung der 

 einschlägigen Erfahrungen POMMER's (45, p. 146) erörtert wurde, durch lange Zeit in Alkohol auf- 

 bewahrt waren, ehe sie mittels des EBNER'schen Verfahrens entkalkt wurden, woran sich, wie gesagt, 

 auch dadurch nichts ändert, wenn solche (lange Zeit in Alkohol aufbewahrte) Knochen vor ihrer 

 gänzlichen Entkalkung durch EBNER'sche Flüssigkeit für einige Zeit in MÜLLER'sche Flüssigkeit 

 gelegt werden. 



Ein dem umgekehrten Färbungsergebnis analoges Verhalten ist, nebenbei bemerkt, auch zu beobachten, wenn von durch 

 viele Jahre in Alkohol aufbewahrten osteomalacischen Knochen im unentkalkten Zustande Schnitte angefertigt und in die besagten 

 stark verdünnten Lösungen von rötlichem oder bläulichem Methylviolett, Violett-Parme, Dahlia, Safranin oder Methylgrün gelegt werden 

 indem solche Schnitte die kalklosen Gebiete intensiv gefärbt, die kalkhaltigen ungefärbt zeigen. 



Allem Anscheine nach beruht, wovon sich schon POMMER überzeugte (siehe oben), der umgekehrte Ausfall der besagten 

 Färbungsmethoden auf der langdauernden Einwirkung des Alkohols. Die Art derselben wäre erst noch durch darauf abzielende 

 eigene Untersuchungen zu ermitteln, die übrigens durch die einschlägigen Versuche POMMER's {45, p. 141 bis 148) über die 

 Bedingungen dieser sechs Färbungsmethoden und über die Eigenschaften der hierzu verwendeten Anilinfarbstoffe etc. bereits ange- 

 bahnt sind. 



Hervorgehoben sei hier noch, daß nach den gewonnenen Erfahrungen Salpetersäureentkalkung 

 für diese Anilinfarbenmethoden sich nicht eignet; die Färbung wird hierbei eine diffuse. 



Denkschriften der mathem.-naturw. Kl. LXXX1X. Bd. jq 



