646 



Um hierbei Erfolg zu haben, ist es durchaus nöthig frisches Material zu verwenden. 

 Ein grosser Zeitverlust erwuchs mir daraus, dass ich zunächst mit Thieren arbeitete, welche 

 schon längere Zeit von mir in Zuchtgläsern cultivirt worden waren. Es war im Winter 

 und die Beschaffung frischen Materials durch das Gefrieren der Gewässer zum mindesten 

 sehr erschwert. Die längere Zeit in Gläsern gehaltenen Thiere entwickelten sich patho- 

 logisch. Sie encystirten sich zwar; aber die Bildung der Tochtercysten („Primärcysten") 

 verschleppte sich oder unterblieb ganz. Oder wenn auch am Anfang der Process normal 

 verlief, so traten doch später (mit der Entwicklung der Secundärcysten) Unregelmässigkeiten 

 auf. Schliesslich starben alle Cysten ab. Erst nachdem ich mir neues Material verschafft 

 hatte, konnte ich im Januar 1897 mehrere durchaus normale Entwicklungsreihen verfolgen. 

 Nachdem ich auf Grund meiner Untersuchungen im Winter 1896/97 meine vorläufigen 

 Mittheilungen veröffentlicht hatte, habe ich den verflossenen Winter benutzt, um an neuem 

 umfangreicherem Material meine früheren Erfahrungen zu controliren und zu erweitern. 



Um an einem Exemplar den gesammten Entwicklungsgang äusserlich verfolgen zu 

 können, cultivirte ich Actinosphaerien in Crystallisirschalen bei niedrigem Wasserstand, so 

 dass eine Untersuchung mit Zeiss A, Comp. Oc. 8 möglich war und ich das Object genau mit 

 Prisma zeichnen konnte. In dieser Weise ist die eine zusammenhängende Entwicklungsreihe 

 gebende Figur 1 Tafel I entstanden. Jede zur Beobachtung gewählte Cyste wurde markirt 

 durch einen auf der Unterseite der Schale angebrachten Tupfen Oelfarbe; sie wurde in den 

 3 Tagen, die vom Beginn der Encystirung bis zum Abschluss der Befruchtung verlaufen, 

 mindestens zu 4 verschiedenen Tageszeiten genau untersucht. 



Ausser dem lebenden Material habe ich viele Hunderte von Cysten nach Reagentien- 

 behandlung untersucht. Zum Abtödten benutzte ich Picrin-Essigsäure, Chrom-Osmium-Essig- 

 säure und Sublimat, zur Färbung hauptsächlich Borax-Carmin. Um die wichtigsten Vor- 

 gänge zu verfolgen, ist es nicht noth wendig die Cysten zu schneiden. Wenn man sie in 

 schwach gepresstem Zustand abtödtet und die Carminfärbung mit Salzsäure-Alkohol stark 

 differenzirt, kann man mit Glycerin oder Nelkenöl die Cysten genügend aufhellen, um 

 von den Grundzügen der Karyokinesen ganz gute Bilder zu bekommen. Die feineren Vor- 

 gänge lassen sich jedoch nur an Schnittpräparaten verfolgen. Hierbei erwies sich die Hei- 

 denhain'sche Eisen-Haematoxylin-Methode besonders mit der Vorfärbung in Bordeaux-Roth 

 als ein ganz unentbehrliches Hilfsmittel. Sehr hübsche Bilder erhält man mit Haemalaun; 

 dagegen gab ich die Färbung mit Safranin-Gentiana-Violet-Orange nach einigen miss- 

 glückten Versuchen auf. 



Ich schildere zunächst den Verlauf der Encystirung in kurzen Zügen. 



Das Actinosphaerium setzt sieh fest, umgiebt sich mit einer Gallertschicht und liefert 

 so eine ansehnliche Cyste, welche wir die Muttercyste nennen wollen. Der Inhalt der 

 Muttercyste wird in Theilstücke von wechselnder Zahl, die „Primärcysten", abgefurcht. 

 Vom Beginn der Encystirung bis zum Ende der Abfurchung verlaufen ungefähr 30 — 35 

 Stunden, wobei etwa 6 — 8 Stunden auf den sehr langsam sich abspielenden Furchungs- 

 process entfallen. 



Die Primärcysten theilen sich nur ein einziges Mal; eine jede liefert somit ein Paar 

 von Cysten, die Secundärcysten. Man kann die Zeit, welche von der völligen Trennung 

 der Primärcysten bis zur völligen Trennung der Secundärcysten verläuft, auf 18 — 24 Stunden 

 schätzen. 



