294 A. Russo, 



corrispondente alle aperture genitali, li ho subito fissato con il mis- 

 cuglio osmo-cr omo-acetico di Flemming. Da quivi, dopo 10 — 15 mi- 

 nuti, lavavo nell'acqua distillata e poi passavo gradatamente nell'alcool 

 a 70% a 90% ed a 96 sia per decolorare sempre più i pezzi, sia 

 per un ulteriore indurimento. Come liquido fissatore mi sono anche 

 servito della soluzione di Acido osmico all' 1% e di quella di Biclo- 

 ruro di mercurio al 2%. Però, nell'uso di questi due liquidi, trovai 

 molti svantaggi, perchè se il primo annerisce troppo, il secondo rende 

 fragili i pezzi per l'indurimento eccessivo e rapido. Le specie di pic- 

 cola mole (ophiotrix, amphiura), avendo voluto fare dei tagli su tutto 

 l'animale, le ho prima decalcificato nel miscuglio cromo-nitrico; fatto 

 da tre parti di acido cromico 1 / 300 ed una di acido nitrico al 20%, 

 ovvero con il miscuglio alcool-nitrico. Avvenuta la decalcificazione, 

 operavo come sopra, sia per decolorare, sia per lavare gli acidi di cui 

 il pezzo si era impregnato. Questi mezzi però, se mi son riusciti uti- 

 lissimi per i tagli in toto, fatti allo scopo di studiare la morfologia 

 degli organi genitali, sono invece poco adatti per una ricerca su gli 

 elementi seminali. A questo scopo di queste specie prendevo solamente 

 gVinterradii, che fissavo con i liquido su riferiti. 



I liquidi coloranti impiegati sono stati: il carminio boracico, il 

 picro carminato di Amm., YEosina alcoolica, il carminio allumico, 

 Yematossilina alcoolica, Yematossilina Böhmer. I migliori risultati, 

 come facilmente s'intende, per il genere di queste ricerche, l'ebbi dal 

 carminio allumico, usato sia in soluzione alcoolica che acquosa, e dalle 

 due ematossiline. Dai pezzi così colorati, dopo essere stati paraffinati 

 ne facevo tagli al microtomo. Feci anche molti preparati per disso- 

 ciazione, sia osservando gli elementi vivi nell'acqua di mare dentro un 

 portaoggetti scavato, sia colorando con i diversi colori di anilina usati 

 nelle indagini istologiche, sia dopo semplice trattamento al liquido di 

 Flemming ovvero all'acido osmico. Questi metodi di dissociazione mi 

 furono molto proficui nello studio della sp er mato genesi. A tale scopo, 

 per meglio vedere le diverse fasi nucleari, dopo che il pezzo era stato 

 fissato e colorato e ben disidratato prendevo cautamente con gli aghi 

 un sacco testicolare che portavo nel vetrimo portaoggetti dove disso- 

 ciavo, mettendovi prima una goccia di Balzamo del Canada molto 



