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bisogna eseguire 100-150 analisi, e si è in pochi, non si può perdere del tempo. 

 Ho adottato quindi il sistema dell'agglutinazione macroscopica. 



A questo scopo dall'Erlernieyer del 2° passaggio, con pipetta sterile, 

 prelevavo 10 ce. di liquido, aspirando gli strati superiori e ripartendolo in due 

 tubi da saggio sterili dei quali uno era tenuto per 2-3 minuti a 100 C. A 

 questa cultura, distribuita in appositi tubicini, veniva aggiunto del siero agglu- 

 tinante in modo da aversi la diluizione di 1 : 1500, 1 : 2000; 1 : 3000; i controlli 

 erano costituiti: a) di un tubicino, ccn cultura senza aggiunta di siero; b) di 

 un tubicino con emulsione di vibrione sicuramente colerico cui si aggiungeva 

 il siero al limite massimo del titolo agglutinante. 



Le osservazioni si pralicavano di 2 ore in 2 ore fino alla 8 a ora, al mas- 

 simo i saggi si mantenevano 12 ore in termostato a 37° C. 



Si giudicavano positivi i casi in cui al fondo del tubo si radunava del 

 deposito e la colonna liquida soprastante appariva limpida. 



1 preparati colorati allestiti col sedimento del tubicino servivano a conferma 

 della osservazione macroscopica. 



Ordinariamente l'agglutinazione si ha nelle prime 2 ore quando trattasi 

 di vibrione proveniente dalle feci. 



Batteriolisi — L'altra quantità di cultura i.i acqua peptone aspirata e 

 portata in tubo da saggio. sterile veniva ripartita in quattro tubicini sterili 

 dove, salvo in uno che veniva conservata per controllo, negli altri tre si aggiun- 

 geva del siero batteriolitico nelle proporzioni di 1:500; 1:1000; 1 : 1500 oltre 

 1 / 2 goccia di complemento dal cuore di cavia normale, e si riponeva il tutto 

 in termortato a 37° C. 



La batteriolisi d'ordinario si inizia dopo circa 20-30 minuti, ma capita 

 spesso vederla iniziare più tardi, dopo parecchie ore, in generale per la diagnosi 

 basta osservare l'inizio del fenomeno, il quale si completa a volte solo dopo 12-14 ore 

 ed allora il liquido è limpido mentre il controllo si è maggiormente intorbidato 

 per sviluppo accresciuto. 



La batteriolisi in vivo fu da me eseguita per tutti i cisi del 1910 paralle- 

 lamente a quella in vitro, però mentre questa, è altrettanto sicura che quella, 

 la prova in vitro, ha il vantaggio ancora di essere meno dispendiosa e meno 

 faticosa. 



Come ho esposto adunque la diagnosi batteriologica di colera, nelle feci, 

 è possibile nella maggioranza dei casi in solo 18-20 ore e cioè: 



