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Methode der Untersuchung. 



Das Material wurde im Freien, und zwar von folgenden Standorten gesammelt. Einen Teil davon 

 sammelte und fixierte Professor v. Wettstein im Gschnitztal in Tirol und überließ ihn mir dann 

 gütigst zur Bearbeitung, den anderen Teil sammelte ich selbst auf Wiesen und Weidegründen in der 

 Umgebung von Komotau in Nordböhmen und Pötzleinsdorf bei Wien. Um eine möglichst lückenlose 

 Reihe der aufeinanderfolgenden Entwicklungsstadien zu erhalten, fixierte ich zu jeder Stunde des Tages 

 und der Nacht eine kleine Partie; in den Morgenstunden sogar in Intervallen von einer halben Stunde, weil 

 zu dieser Zeit die Kernteilungsvorgänge ganz besonders rege verlaufen sollen. Als Fixierungsflüssigkeiten 

 kamen zur Anwendung: Alkohol-Eisessig (absol. Alkohol und Eisessig = 3:1), Bonner Gemisch (2% 

 Osmiumsäure 24 cm 3 , 1% Cbromsäure 180 cm 3 , Eisessig 12 cm 3 , dest. Wasser 210 cm 3 ) und Pfeiffersches 

 Gemenge (gleiche Teile von 40% Formaldehyd, rektifiziertem Holzessig und Methylalkohol). Von allen 

 drei Fixierungsflüssigkeiten konnte eigentlich keine so recht befriedigen. Die jungen Stadien des Embryo- 

 sacks bis zur Endospermbildung ließen nichts zu wünschen übrig, dagegen war das äußerst zarte Endo- 

 spermgewebe in den meisten Fällen stark geschrumpft. Die Pfeiffersche Flüssigkeit fixierte eigentlich am 

 besten, doch nahmen die Schnitte dermaßen stark den Hämatoxylinfarbstoff auf, daß sie aus diesem Grunde 

 einfach unbrauchbar waren. Das Bonner Gemisch, das am stärksten kontrahiert, stellte sich für das Stadium 

 der Befruchtung als günstig heraus. Wenn man nämlich die so fixierten Präparate nicht wie sonst üblich 

 mit Wasserstoffsuperoxyd behandelt, so zeigt der Pollenschlauch immer eine gelbgrüne Färbung, wodurch 

 er sich scharf von dem übrigen Gewebe abhebt. Eingebettet wurden die Objekte auf die übliche Weise in 

 Paraffin und mit dem Mikrotom in Serien von 2 fi, bis 10 [i zerlegt, je nach dem Alter des betreffenden 

 Objekts. Was dieFärbung anbelangt, so verwendete ich hauptsächlich Hämatoxylin nach einem Rezept, 

 wie es im Strasburger'schen Institut gebraucht wird, und dann auch Safranin, das sich als weniger vorteil- 

 haft erwies. Die größten färbetechnischen Schwierigkeiten machte das Befruchtungsstadium. Der Pollen- 

 schlauch, der prall erfüllt ist mit einem dichten feinkörnigen Plasma, speicherte so sehr den Farbstoff, 

 daß er, wenn beim Differenzieren das übrige Gewebe schon wieder ganz entfärbt war, immer noch 

 undurchsichtig war. Bedenkt man noch, daß der Plasmainhalt des Pollenschlauches beim Entlassen der 

 Spermakerne oft herausquillt und die Eizelle als homogene, tief dunkelgefärbte Masse umhüllt, so wird 

 es begreiflich erscheinen, daß der Befruchtungsakt sehr schwer zu konstatieren ist. Die Präparate waren 

 dabei nicht länger, als 20 bis 30 Minuten im Hämatoxylin. Außer der Färbung war es noch ein anderer 

 Umstand, der der Untersuchung recht hinderlich im Wege stand. Es ist das die gänzlich regellose Orien- 

 tierung der Ovula im Fruchtknoten. Nur die oberste Samenanlage in jedem Fache des zweifächerigen, 

 herzförmigen Fruchtknotens ist immer gleich orientiert, und zwar so, daß sie auf Längsschnitten durch den 

 Fruchtknoten auch stets längs getroffen ist. Hier oben im gewölbten Teil des Gynöceums ist am meisten 

 Platz vorhanden; gegen das spitze Ende zu werden aber die räumlichen Verhältnisse immer geringer und 

 so zwingt denn das Bestreben nach bester Raumausnützung die ihrer Zahl nach nicht wenigen Samen- 

 anlagen, die verschiedenartigsten Stellungen einzunehmen. Während also diese beiden zu oberst gelegenen 

 Ovula eines jeden Fruchtknotens auf allen Schnitten schön längs getroffen waren, war das in bezug auf 

 die übrigen nicht der Fall. Im günstigsten Falle waren es höchstens fünf oder sechs Samenanlagen, die in 

 der gewünschten Weise getroffen waren, während vielleicht 20 bis 25 Ovula in jedem Gynöceum zur 

 Ausbildung gelangen. Aus diesem Grunde also mußte eine sehr große Anzahl von Schnittserien ange- 

 fertigt werden. 



