7 dell'azione di alcuni sieki citotossici sugli oegani bmatopoetici 79 



e colorabili, fra cui pochi muniti di granuli, si passava a preparati con eritrociti di 

 tutte le grandezze, dai micro ai macrociti, e questi ultimi abbondanti e forniti di 

 ricco apparato granulare; inoltre evidente era la policromatofilia degli elementi. 



Di raro si vedevano normoblasti nel sangue, e non mai, anche nei più alti 

 gradi di anemia provocati da sieri emolitici, quelli eritrociti punteggiati a minute 

 granulazioni basofìli che sono certo il prodotto di processi degenerativi. Da questi 

 devono assolutamente essere ben distinti i suddetti eritrociti a granuli tingibili col 

 rosso neutro o col Cresijl e che si trovano in fase rigenerativa. Esaminate tenui di- 

 lacerazioni di midollo delle ossa di questi animali, col rosso neutro, o col Cresyl, si 

 trova che tutti i globuli rossi nucleati hanno intorno al nucleo l'apparato granulare 

 tingibile colle predette sostanze, come già ha descritto il Maximow, ed è dopo la 

 fuoriuscita del nucleo, che i detti eritrociti giovani circolano nel sangue ancora for- 

 niti del loro apparato granulare. Questo fu certo visto da molti osservatori e da me 

 molti anni prima che si introducesero le nuove materie coloranti nella tecnica isto- 

 logica, ma ei'a stato erroneamente interpretato come il prodotto di cariolisi del nucleo 

 dei normoblasti. In realtà dai normoblasti il nucleo fuoresce omogeneo e picnotico, 

 e viene spesso fagocitato da elementi incolori che lo distruggono. 



I vetrini riscaldati alla fiamma o alla stufa a 90° per 2 ore, venivano poi co- 

 lorati o coll'ematossilina eosina o colla triacida; di raro i vetrini fissati in alcool 

 vennero colorati col metodo di Giemsa. 



Col primo metodo, come è ben noto, si fissano e si colorano assai bene i leu- 

 cociti polimorfi, i mononucleati e i linfociti, i quali sono i tre elementi che hanno la 

 predominanza assoluta nelle iperleucitosi sperimentali. L'esame fatto di ogni caso 

 del sangue raccolto nel corso delle esperienze, del midollo delle ossa dilacerato a 

 fresco sui vetrini, dei tagli di midollo, di ghiandole linfatiche, di milza e di polmone, 

 porgevano elementi sufficienti a far conoscere quale azione avesse esercitato il siero 

 citotossico sul complesso degli organi ematopoetici e su altri organi. 



Affinchè i termini di confronto fossero il piìi possibile paragonabili tra loro, si 

 usava iniettare o il sangue defibrinato o l'estratto dei vari organi nelle vene auri- 

 colari del coniglio, ad uguali distanze di tempo e si cercava che in complesso l'ani- 

 male avesse ricevuto quantità corrispondenti di una data sostanza. Indi l'animale 

 veniva lasciato a riposo 8-12 giorni dopo l'ultima iniezione, e si uccideva per sa- 

 lasso. Poscia si cominciava l'iniezione del siero a dosi quotidianamente crescenti, 

 nella vena auricolare di un robusto coniglio, e secondo la quantità disponibile di 

 quella, se ne iniettavano complessivamente 5-10 e. e. L'animale veniva quindi lasciato 

 a riposo per 3-4 giorni, indi si uccideva per colpo sulla nuca, e si raccoglievano 

 immediatamente gli organi da esaminare, sia nel liquido Foà, sia nel liquido Zenker 

 in cui i piccoli pezzetti rimanevano 24 ore, poi si facevano lavaggi ripetuti in acqua, 

 acqua e alcool, alcool iodato, alcool assoluto, e imparaffinamento. 



Gli animali impiegati per ottenere i sieri citotossici furono cavie, conigli, polli, 

 oche e anitre. Per le ricerche emolitiche si iniettava sangue defibrinato di coniglio 

 nella cavità addominale della cavia a dosi crescenti da 2-8 e. e. e alla distanza di 

 6-8 giorni, per 4-5 volte; indi si lasciava a riposo l'animale per 8-10 giorni avanti 

 di salassarlo. Altrettanto si faceva col. sangue defibrinato di coniglio da iniettarsi 

 ordinariamente nella cavità addominale dell'oca, del pollo o dell'anitra. 



