474 A. C. Hof: Färberische Studien an Gefäßbündeln. 



C. Fixage-Elektivfärbungen. 



(Elektivfärbungen an fixiertem Gewebe.) 



Von großem Interesse war es, das Verhalten der reduziblen Farbstoffe gegenüber fixiertem 

 Gewebe festzustellen; denn die neue Farbemethode hatte ja nur dann weitgehendere Bedeutung, wenn 

 es gelang, die bei der Anfärbung frischen Gewebes geltenden Gesichtspunkte auch auf die Färbung 

 fixierter Gewebe zu übertragen. Es war zunächst zweifelhaft, ob nach der Fixation durch die bekannten 

 Fixierungsmittel das chemische Verhalten der Zellgewebe nicht derart geändert würde, daß beim 

 Färben die reduktionsfeste chemische Bindung zwischen Farbstoff und Gewebe jetzt ausblieb. Aus 

 der Reihe der bekannten Fixierungsmittel schieden von vornherein als unbrauchbar die verschiedenen 

 Osmium-Essigsäuregemische aus. Am besten bewährt haben sich lüproz. Formaldehyd und Gemische 

 von Formaldehyd und Alkohol (Guillandsche Lösung: 1 Teil Formol, käufliches 40proz., 9 Teile 

 Alkohol). 



Färbt man Querschnitte kleiner Stengelstücke, die in Guillandscher Lösung fixiert wurden, in' 

 der geschilderten Weise, so beobachtet man, daß die reduziblen Farbstoffe jetzt bei weitem schlechter 

 anfärben als an frischen Schnitten. Durch die Fixierung werden also die chemischen Eigenschaften 

 der Gewebe, wie zu erwarten, wesentlich abgeändert. Daß jedoch immer noch, wenn auch stark 

 vermindert. Affinität zwischen reduziblem Farbstoff und Gewebsfaser bei fixiertem Objekt besteht, 

 zeigt sich unschwer, da ja, wie oben gesagt, die Farbstoffe, wenn auch schlecht, immer noch anfärben. 

 Es galt daher, Mittel und Wege zu finden, die Anfärbbarkeit der fixierten Faser durch die betreffenden 

 Farbstoffe zu erhöhen. Es wurden zunächst bekannte Beizen der Färberei angewendet, wie Tannin, 

 Alaun, Eisensalze, Chrombeize und andere mehr; alle, wie erwartet, mit negativem Ergebnis. Denn 

 eine Beize beizt meist den Schnitt als Ganzes; eine Sonderstellung kommt hierin dem Eisenchlorid 

 zu, das neben der allgemeinen beizenden Wirkung noch auf einige Gewebe elektiv beizend einwirkt. 

 So kann das Eisenchlorid als spezifische Beize für die Endodermis des Gefäßbündels von Pteris aguilma 

 gelten. Es läßt sich schon deutlich unter der Lupe beobachten, wie bei Einwirkung einer verdünnten 

 Eisenchloridlösung mit einem Male die Grenzzellen (Endodermis) des Gefäßbündels schwarz gefärbt 

 in die Erscheinung treten. Auffällig günstig auf die Intensität der Färbung hingegen wirkt der 

 Zusatz einiger neutralen Salze zur Farblösung, vor allem ein Zusatz von Magnesiumsulfat, Natrium- 

 sulfat und Natriumchlorid. Durch Kontrollen kann man leicht feststellen, daß ein Farbbad mit 

 Zusatz von Magnesiumsulfat einem Farbbad mit Zusatz von Natriumchlorid hinsichtlich der Färbe- 

 geschwindigkeit mehrfach überlegen ist. 



D. Einfache Elektivfärbungen an fixiertem Gewebe. 



Hierzu eignen sich dieselben reduziblen Farbstoffe, die bei der Rezent-Elektivfärbung Verwendung 

 fanden. Die besten Resultate ergaben Farbstoffe der Triphenylmethan-, der Pyronin-, der Azingruppe. 

 Man bringe die z. B. in Guillandscher Lösung fixierten Schnitte in das betreffende Farbbad. Ich 

 habe nachfolgende Zusammensetzung des Farbbades gewählt, bemerke aber, daß auch andere ebenso 

 gut arbeiten müssen, wenn man nur auf folgende drei Punkte Rücksicht nimmt: 



1. Man arbeite bei fixiertem Material mit verdünnten Farblösungen. 



2. Man belasse die Schnitte mindestens 4 — 5 Stunden in der Lösung. 



3. Man füge stets als Färbeverstärker einen Zusatz von Magnesiumsulfat, Natriumsulfat oder 



Natriumchlorid zu. 



