— 491 — 

 moltissime volte, prelevando il materiale tanto dagli animali vivi, quanto da quelli 

 appena morti di tetano. 



Le culture in blocco su siero e su agar a contatto dell' ossigene , non mi hanno 

 mai dato risultati soddisfacenti, perchè già in 2 a giornata, sempre poi in 3 a gior- 

 nata, i germi della putrefazione vi predominavano e inoculandone le culture ai 

 conigli, li vedevo morire in poche ore (20 a 24 ore), senza presentare segno 

 alcuno di tetano. 



Risultati alquanto migliori li ho ottenuti modificando alquanto il modo di ese- 

 guire le culture. 



Li 4 Febbraio una goccia di pus raccolta da un focolaio di un coniglio, morto 

 di tetano tipico da circa un' ora e mezzo, la diluisco in 10 centimetri cubi di 

 acqua distillata e sterilizzata. 



Ne raccolgo un poco con una pipetta di vetro e semino , con cinque goccie 

 per ognuno , due tubetti di agar, precedentemente fatto sciogliere , poscia ognuno 

 di essi li verso separatamente in due scatolette di vetro a fondo piano e li metto 

 nella stufa a 37°. 



In seconda giornata in ambedue le culture a piatto si è sviluppato un discreto 

 numero di colonie isolate, il maggior numero delle quali però sono formate dallo 

 sti'eptococco piogeno bianco, altre da colonie di lunghi bacilli contenenti spore, e 

 alcune poche da un grosso diplococco a forma di otto di cifra. Anzi una delle 

 placche non presenta che queste colonie ; nell' altra invece verso la periferia vi 

 esistono tre o quattro piccole colonie che pel loro aspetto si differenziano anche 

 ad occhio da tutte le altre. Sono della grandezza di poco più di una capocchia di 

 uno spillo, infossate a scodellino e presentanti un fondo un poco opacato e diffluente. 



Evidentemente hanno prodotto una limitata liquefazione dell' agar, attorno al 

 punto nel quale si sono sviluppate. 



Al microscopio mi presentarono 1' aspetto, che è rappresentato esattamente nella 

 figura l a e cioè erano formate di bacilli spiniformi e setolosi ( unitamente a poche 

 granulazioni libere) affatto assomiglianti a quelli che si riscontrano nei focolai 

 purulenti putridi dei conigli morti di tetano, in seguito all' inoculazione di terra. 



Nei giorni successivi ( 3°, 4°, 5°) queste colonie si dilatarono alquanto conser- 

 vando però sempre i caratteri fondamentali che ho or ora accennati. 



Una piccola quantità di una di queste colonie la diluisco in cinque centimetri 

 cubi di acqua sterilizzata e con una goccia di questa diluzione semino un altro 

 tubetto di agar fuso a moderata temperatura e faccio una nuova cultura a piatto 

 in scatoletta di vetro. 



Dopo tre giorni di stufa ottenni un grande numero di queste colonie coi caratteri 

 di quelle prime e costituite dagli stessi microrganismi. 



Noto che nessun odore di putrefazione ebbi ad avvertire in queste culture a 

 piatto. 



