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siiti, l'orse non in tutti i casi assolutamente veritieri per la irregolare distribuzione dei 

 germi in seno all' essudato. 



Ne preferibile ci parve la via peritoneale prescelta per questi studi dalla maggioranza 

 degli sperimentatori, a causa del disturbo che avrebbe potuto risentire 1" animale quando, 

 come nel caso nostro, fosse stato necessario seguire le ricerche per un tempo abbastanza 

 lungo, e praticare di conseguenza un numero di saggi abbastanza rilevante. 



Migliore ci parve, invece, la via endovenosa, come quella che avrebbe dato luogo ad 

 una repartizione abbastanza regolare nella massa del sangue dei germi introdotti, e che, 

 senza grave disturbo dell' animale, ci avrebbe facilmente consentito di ripetere finche fosse 

 stato neeessario le osservazioni di saggio. 



Scelta questa via per la introduzione del virus, ecco come abbiamo proceduto nei nostri 

 esperimenti. 



Quando si voleva determinare solo una immunità passiva, si praticava nella stessa 

 seduta una iniezione di siero e di coltura in brodo nostro, iniettando il primo separata- 

 mente, nella quantità voluta, nella vena marginale di un orecchio, la seconda, sempre 

 nella dose di cm 1 0,2, nella vena marginale dell'altro. 



Quando poi si voleva conferire all' animale una immunità attiva, allora, dopo aver 

 determinato l' immunità fondamentale col metodo sopra indicato, si praticava il rinforzo 

 con iniezioni successive di coltura in brodo nostro a dose progressivamente crescente, come 

 è stato particolarmente indicato nel nostro precedente lavoro (1). 



Per determinare a vario periodo dell' esperimento la presenza nella circolazione dei 

 germi iniettati, non ci è sembrato sufficiente il semplice esame microscopico del sangue, 

 perchè, se questo può dare risultati sicuri in primo tempo, o quando il numero dei germi, 

 tanto liberi quanto raccolti sui globuli bianchi, è molto rilevante, dà invece risultati molto 

 incerti quando, per la conferita immunità, i germi stessi hanno subito entro i globuli bian- 

 chi quelle trasformazioni che non permettono più di distinguerli facilmente dalle granula- 

 zioni del citoplasma, con le quali si confondono tanto per la grossezza quanto per le co- 

 lorazioni che assumono! 



Così, per meglio stabilire la presenza nella circolazione dei germi iniettati, abbiamo 

 fatto ricorso esclusivamente alla coltura del sangue, aspirato nella quantità di 2-3 goccie 

 da una vena dell' orecchio e mescolato ad una sufficiente quantità di brodo ordinario. Né 

 in tali nostre indagini ci siamo sempre fermati al primo risultato negativo, perchè l'espe- 

 rienza ci aveva dimostrato che qualche volta, per quanto assai raramente, e forse in relazione 

 della piccola quantità del materiale usato, la coltura può rimanere sterile, mentre un' ul- 

 teriore osservazione dimostra ancora la presenza in circolo dei germi specifici. 



Perciò, nei nostri esperimenti, quando sarà registrata una sola prova negativa, ciò sta- 

 rà a significare che il risultato non deve esser considerato come definitivo. Invece, potrà 

 dichiararsi chiuso 1' esperimento, quando almeno 2 saggi consecutivi di sangue siano ri- 

 masti sterili. 



(1) Loc. ind., pag. 335. 

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