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 comune cui siasi aggiunto estratto Liebig nella proporzione dal 5 al lo p. ' ,) osi passan 

 per 24 ore in termostato alla temperatura di 39 a 40°. Se vi è intorbidamento l'acqua 

 contiene termofili; se colla quantità di acqua adoperata di 100 cm 3 non vi è intorbida- 

 mento, l'acqua si può ritenere suffieentemento pura: o non vi sono termofili, o per lo meno 

 in proporzioni trascurabili. 



Stabilita la presenza generica dei termofili, è necessario determinarne il titolo, e suc- 

 cessivamente isolare le specie. 



Per determinare il titolo si adoperano quantità variabili di acqua e si fanno diluzioni 

 diverse a seconda del presumibile grado di inquinamento. 



Nella maggioranza dei casi conviene usare nelle prime prove, le seguenti quantità 

 di acqua: 100 cm 3 , 10 cm 1 , 1 cm 3 , l / 10 di cm 3 , 1 /. di cui', cui si aggiungono rispettivamente 

 100 cm 3 di brodo, 10 cm 3 e 5 cm 3 per le quantità minori. 



Se T acqua è più o meno fortemente inquinata, bisogna adoperare quantità molto mi- 

 nori di acqua e fare delle diluzioni. 



Per le acque moderatamente inquinate, si prendono tre provette contenenti ciascuna 

 10 cm 3 di acqua sterilizzata. Ad una di queste provette si aggiunge 1 cm 3 dell* acqua da 

 esaminare, si mescola bene, poi se ne prende un cui' e si semina nella seconda, e da 

 questa un altro cent, cubico che si passa nella terza provetta : si banno così le diluzioni 

 1 : 10 — 1 : 1000 — 1 : 100,000. 



Se 1" acqua è ancora maggiormente inquinata, bisogna fare delle diluzioni più forti. Si 

 prendono tre matracci contenenti ognuno 100 cent, cubici di acqua sterilizzata, si aggiunge 

 al primo 1 cent, cubico, si mescola e se ne passa successivamente 1 cent, nel secondo, si 

 mescola di nuovo, e se ne passa 1 cm 3 nel terzo matraccio. Si hanno così le diluzioni 

 1 : 100 — 1 : 10.000 — 1 : 1,000,000. 



In questo modo si possono avere diluzioni a grado diverso ed, a seconda del grado di 

 intorbidamento, si può stabilire il titolo del contenuto dei microrganismi termofili. 



Per T isolamento successivo dei germi, e lo studio dei caratteri morfologici e biologici, 

 si usano i metodi generali di tecnica batteriologica, od anche quelli che indicherò per il 

 gruppo tifo-coli. 



La presenza dei termofili in genere, e sovrattutto di alcuni di essi, è l' espressione 

 di un inquinamento. Ne vedremo più avanti il significato. 



Microorganismi della putrefazione in genere 

 e della fermentazione ammoniacale. 



I microorganismi della putrefazione in genere e quelli della fermentazione ammoniacale, 

 hanno un' importanza speciale. Questi microorganismi, sovrattutto il germe proteo, il bacillo 

 liquefaciente fluorescente verde, il bacillo fluorescente non fluidificante, il batterium termo, 

 il bacillo jantico, essendo, si può dire, satelliti dei termofili in genere e del gruppo coli-tifo 

 in specie, devono sempre essere cercati. 



Questi microorganismi, come si sa, hanno una temperatura ottima fra i 15-25° e si 



