introdotto, della eia e razza dell'animale scello, degli incidenti vari che una dilacerazione 

 nella sostanza cerebrale può produrre, comprese le emorragie parenchimali, preparazioni 

 infine che non sono dosal.e per nulla nel loro contentili) virulento o sterile, rappresentano 

 altrettante incognite che uno sperimentatore oculato deve togliere dal campo della 

 ricerca. 



Ho detto che il materiale d* inoculazione non è dosalo, o è mal dosato e ciò si verifica 

 anche nelle esperienze interessanti e accurate del nostro Puntoni. Questi ha notato 

 bene e ripetutamente come sia necessario tritare a lungo in mortaio la sostanza nervosa 

 virulente per farne l'emulsione sospensione in soluzioni fisiologiche più o meno fenicate 

 ed ha fissalo il termine di 15° minuti per una triturazione in mortaio di vetro o porcellana. 

 Dieci minuti dunque e sono già molli e molti sarebbero anche cinque, sono insufficienti allo 

 scopo, ma le superfici del pestello e del mortaio più o meno ampie, la rapidità della ma- 

 novra, la pressione esercitata, l'aggiunta più o meno lenta del liquido non sono forse 

 elementi di grande importanza, non possono essere causa di minore o maggiore suddivisione 

 e quindi di varia influenza sterilizzante dell'acido fenico, dal momento che la maggiore 

 o minore suddivisione rende conto di così grande disparità di effetti? 



E poi, emulsionala la sostanza nervosa, il Puntoni, e con lui i più attenti, consigliano 

 e usano di passar il liquido sopra setaccio, per tener indietro certamente un materiale più 

 grosso che altri 5 o 10 minuti di triturazione avrebbe ulleriormente suddiviso. E allora 

 se nel mortaio abbiamo messo 5 di sostanza nervosa in 100 di liquido, che cosa resterà 

 di quel 5 nella emulsione filtrata? Io dico questo perchè con ciò mi spiego i diversi 

 risultali, ma son persuaso che dall' 1 °/ in su tutte le emulsioni di virus pollate su parti 

 certamente vulnerabili dalla rabbia devono raggiungere lo scopo. 



Io ricordo le esperienze eseguite da nostrani e stranieri per attenuazioni artificiali di 

 virus fisso e le graduazioni esemplari che si avevano (e certamente dovevano essere veri- 

 tiere) nei protocolli sperimentali relativi. 



E [ter dirne una rammento l'effetto del riscaldamento come era slato vantato da 

 Puscariu e Vesesco secondo i quali la permanenza di virus per 10' da 60° a 80° 

 produceva la sterilizzazione, e relativa sopravvivenza dei conigli inoculali, l'esposizione 

 a 50° riduceva la virulenza in modo che i conigli morivano dopo 11 giorni e mezzo, a 45° 

 dopo 11, a 40° dopo 10, a 35° dopo 9, a 30° dopo 9. mentre il virus fresco uccideva dopo 

 8 giorni dalla inoculazione. 



Ebbene, una prova che io feci" e che pubblicai nella mia terza comunicazione statistica 

 mi dimostrò che una emulsione all' l°/ , non filtuata, mantenuta a 70', per 15' era perfet- 

 tamente sterilizzata e questo dato di fatto io utilizzo anche oggi e quindi ho potuto mille 

 volle riprodurre. A 50° si ebbe l'incubazione al 6° giorno e la morte al 7°, a 45° in 3 casi 

 si ebbe nel 1° l'incubazione al quarto giorno, nel 2° l'incubazione al sesto, nel 3° l'in- 

 cubazione al settimo e la morte avvenne rispettivamente al 5", al 7° e all' S° giorno. Il 

 soggiorno a 35° non produsse differenza dal controllo e cioè incubazione al 4* e morte 

 al 6° giorno. 



Questa prova mi rese mollo incredulo sulle graduazioni dell'attenuazione ammesse 



