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Allora, il giorno 27 luglio, con ogni precauzione e valendomi di una pipetta della 

 capacità di 30 ce. circa, passai il brodo di ciascuna boccia di Erlenmeyer in altra boccia 

 simile e lo sostituii con altrettanto brodo sterile, dopo di che osservai che in 4 stipiti 

 (Gurbin, Sratulat, Ceremus e Minus) il 2° lavaggio nacque sollecitamente, da 1 a 3 

 giorni, mentre il 1° si sviluppò solo dopo 7 giorni; e che negli altri due stipiti (Soltus, 

 Ursu) il 2° lavaggio nacque rispettivamente dopo 24-48 ore, mentre il 1° non sviluppò 

 affatto. 



In seguito a questi risultati pensai di esagerare ancora l' esperienza, allungando 

 considerevolmente nelle corrispondenti colture del sedimento del siero i termini del 

 lavaggio, e lasciando passare molto più tempo fra il 1° ed il 2° lavaggio, anche per 

 vedere se i germi in questione, rimanendo più a lungo in condizioni sfavorevoli, eventual- 

 mente morissero. Il risultato ottenuto fu véramente impressionante ! 



Rinnovato il brodo nelle colture Ursu e Soltus fatte col sedimento dei siero, che 

 per 15 giorni si erano dimostrate sterili, e ripetuta la stessa operazione nelle colture 

 dello stesso ordine relative agli stipiti Gurbin e Stratulat, che per 18 giorni non 

 avevano lasciato vedere alcun germe, si notò sviluppo della coltura dopo 1-2 giorni 

 nel 2° lavaggio, mentre il brodo del 1° lavaggio si conservò sempre sterile. 



Ciò prova, non solo la bontà del metodo, che altrimenti l'inquinamento accidentale 

 doveva colpire indifferentemente una delle due bocce o tutte due insieme, ma prova 

 ancora che 70-80 ce. di brodo non sono sufficienti per annullare il potere di difesa 

 del siero, quello almeno che si manifesta sotto forma di azione inibitrice sullo sviluppo 

 della coltura, e che perciò il metodo della diluizione semplice non sempre può servire 

 allo scopo. 



Per ultimo volemmo confrontare i due metodi di lavaggio, cioè quello vecchio in 

 provetta con piccola quantità di brodo, e quello nuovo in bocce speciali con grandi 

 quantità dello stesso brodo. 



Con questo intendimento dalla piegatura del braccio di uno stesso ammalato (Cre- 

 merius) furono presi due saggi di sangue, uno dal braccio destro l' altro dal sinistro, 

 ed uno dei coaguli fu lavato in provetta come si faceva precedentemente, l'altro diluito 

 e lavato in boccia speciale con grandi quantità di brodo (250 ce.) come da mie pro- 

 poste ultime. 



Trovammo allora che col metodo nuovo del lavaggio con forti quantità di brodo, 

 la coltura nacque dopo 36 ore nel 2° lavaggio, dopo 13 giorni nel 1°; e che col 

 col metodo vecchio del lavaggio in provetta con piccole dosi di brodo, la coltura dello 

 stesso sangue sviluppò solo dopo 4 lavaggi e dopo 10 giorni d' incubazione, 15 dalla 

 presa del sangue, mentre i tre precedenti lavaggi rimasero definitivamente sterili. 



Questo ci dimostra che 3 X 20 = 60 ce. di brodo non erano stati sufficienti a 

 metter da parte i' azione inibitrice del siero, e che occorse un 4° lavaggio con altri 

 20 ce. di brodo per ottenere lo sviluppo della coltura. Perciò possiamo dire che il 

 metodo vecchio risponde pure bene, ma meno prontamente del nuovo, il quale per 

 questo pregio è da preferirsi, anche perchè il primo può riuscire insufficiente in quei 

 casi in cui il potere inibitorio del siero è molto elevato. 



