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dicata muoiono prima delle 48 ore, in genere dalle 36 alle 40 ore. La po- 
tenza delle tossine però varia moltissimo da seminagioni a seminagioni, da 
cultura a cultura, da matraccio a matraccio. Come già accennai diverse cir- 
costanze influiscono potentemente ed in ispecie la cultura prima, la reazione 
del materiale nutritivo, la temperatura; ma purtroppo alle volte non sap- 
piamo trovare la ragione di differenze enormi che si riscontrano in matracci 
seminati collo stesso materiale e mantenuti nelle identiche condizioni. È 
perciò assolutamente necessario preparare delle tossine in grande, aver 
molti matracci, di diversa data, di diversi brodi, per poter poi avere la 
quantità di tossina necessaria. Ecco perché occorrono grandi mezzi, ed 
ecco perché, volendo o no, la preparazione del siero antidifterico sarà sem- 
pre un lavoro delicato e costoso. 
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Immunizzazione del cavallo 
Gli esperimenti di immunizzazione vennero fatti su tre cavalli i quali 
naturalmente presentavano tutti i segni di una perfetta salute e che per 
maggior sicurezza vennero prima sottoposti anche alla iniezione della mal- 
leina. L’immunizzazione venne ottenuta basandosi sulle indicazioni date dal 
Berhing e dal Roux e un po’ su quanto vidi fare in Germania e in 
Francia. L’immunizzazione del cavallo, però che a tutta prima sembra 
tanto facile, presenta certe difficoltà e richiede un certo esercizio. 
In tesi generale io procedetti in modo da ottenere i primi gradi di 
immunizzazione con piccole dosi gradatamente crescenti e ripetute a brevi 
intervalli di tossine o culture, dapprima attenuate, poi pure; successivamente 
cercai di ottenere gli alti gradi di immunità con dosi forti ad intervalli 
maggiori, ed alternativamente per via sotto cutanea ed intravenosa. 
Non si possono dare norme generali, perché la suscettibilità individuale 
é grandemente diversa, ma ad ogni modo si può dire che bisogna proce- 
dere con molta prudenza, specialmente nelle prime inoculazioni sottocuta- 
nee e nelle forti dose intravenose, e fa d’uopo ritenere come assioma: 
fondamentale che sono più proficue le dosi moderate e frequenti, anziché 
le grandi dosi a lunghi intervalli, e che il modo di procedere nella immu- 
nizzazione, più che dalla dose di tossina, deve essere indicato dalla reazione 
locale e dai fenomeni generali. 
Nei singoli casi io procedetti alquanto diversamente. Non mi dilungo 
su questa parte perché nei tracciati che presento sono indicate, od almeno 
credo siano indicate, tutte le fasi della immunizzazione. 
