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larga scala, è necessario isolare il bacillo da diversi casi di difterite grave 
ed esperimentarne la virulenza ed il potere tossico delle culture. 
Per la preparazione delle tossine é indifferente usare il metodo di Roux 
o quello di Behring. Col metodo di Roux si hanno tossine potentissi- 
me in un tempo più breve e forse il bacillo non si attenua; anche col 
metodo di Behring però si possono avere tossine molto attive. Quello 
che specialmente merita attenzione è il grado di alcalinità dei brodi. I 
brodi non devono essere troppo alcalini, e 1’ alcalinità deve essere sem- 
pre misurata esattamente. Bisogna pure avere molto riguardo alla tem- 
peratura delle stufe: la temperatura non deve mai oltrepassare i 37° e 
deve essere per quanto è possibile costante. Altra condizione essenziale è 
la purezza delle culture e delle tossine. 
Le tossine atte all’ immunizzazione del cavallo devono avere un alto 
grado di tossicità. Come termine minimo si può ritenere una tossina di 
cui 0,3 cme. ammazza un kilogramma di cavia in 48-50 ore: sarebbe 
pero desiderabile che le tossine ammazzassero in 48-50 ore le cavie di 
500 grammi alla dose di 0,1 cme. 
Per l’ immunizzazione propriamente detta del cavallo non si possono 
dare norme generali, poiche la suscettibilità individuale è grandemente 
diversa. Si deve però ritenere come stabilito che bisogna procedere: con 
molta prudenza nelle prime inoculazioni e nelle forti iniezioni intraveno- 
se: che sono più proficue le dosi moderate e ripetute spesso anziché le 
grandi dosi a lunghi intervalli: che il modo di procedere, più che dalla 
dose di tossina, deve essere indicato dalla reazione locale e dai fenomeni 
generali, specialmente dallo stato del sistema nervoso e dell’ apparecchio 
urinario. 
La determinazione del potere antitossico del siero è un lavoro piutto- 
sto delicato e che deve essere condotto con molto scrupolo di misurazio- 
ne e con termini di confronto. È assolutamente necessaria una tossina- 
testo esattamente dosata nel senso di Behring-Ehrlich. 
Lo siero dei nostri cavalli, di uno in ispecie, possiede già un elevato 
potere antitossico. Colle ulteriori iniezioni questo potere sicuramente au- 
menterà e spero che, avuto il controllo governativo e la debita autorizza- 
zione, potra essere vantaggiosamente applicato nella cura della difterite 
dell’ uomo. 
