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del cambiamento o viraggio del colore etc. si può ammettere o meno la presenza di 

 microrganismi del gruppo-coli nell' acqua in esame. 



Stabilita la presenza generica di microrganismi del gruppo, bisogna procedere alla 

 diagnosi batteriologica qualitativa, e qui le difficoltà sono grandissime, anzi aumentano 

 ogni giorno, per le diverse specie di microrganismi che si includono nel gruppo, per le 

 loro relazioni ed anche variabilità e mutazioni. 



Qui è necessario istituire una serie di prove culturali, nei vari substrati e mezzi 

 indicati, e ricorrere anche alle prove biologiche. Questa parte dell'indagine deve essere 

 condotta col massimo rigore, ed un giudizio definitivo non deve essere pronunciato se non 

 quando tutte le prove siano state espletate. 



I mezzi d' indagine batteriologica che meglio servono sono le culture condotte in 

 modo comparativo in substrati liquidi e solidi. 



I substrati liquidi che danno i migliori risultati, ed anche in un periodo di tempo 

 breve, sono i brodi acidi e fenicali, i brodi lattosati e glucosati, sopra ricordati, i brodi con 

 nutrosio, i brodi colorati colla fenolftaleina, o meglio col tornasole, i brodi al rosso neutro, 

 i brodi al verde malachite (Lòffler) od al verde brillante, (preparati come per Pagar) 

 il siero di latte con tornasole. 



Meglio che i substrati liquidi però, per la diagnosi differenziale, servono i substrati 

 solidi, e specialmente l'agar con tornasole e cristal violetto col metodo Drigalski 

 Con radi, l'agar con tornasole e mannite. l'agar caffeina di Roti), (23), l'agar caffeina 

 cristalvioletto di Hoffman e Fischer (24), l'agar col rosso neutro secondo Rothber- 

 ger (25) e Scheffler, l'agar fuxina secondo Endo, l'agar al verde malachite secondo 

 Lòffler, Lentz e Tietz (26), Pad le v vsky (27), l'agar di Dolt, l'agar al Bril- 

 lantgrun Kristall ed acido picrico di Conradi (28) e l'agar con fuxina acida e verde 

 malachite secondo Kindborg (29). 



Seguendo questi metodi d'indagine batteriologica in modo comparativo, e tenendo 

 calcolo delle indicazioni che danno gli autori sopracitati, si può arrivare alla diagnosi dif- 

 ferenziale di specie. Ritengo completamente superfluo riportare tutti i caratteri differenziali, 

 ed i criteri diagnostici; mando ai lavori originali. 



Le prove biologiche, agglutinazione ed esperimento di innesto, sono un validissimo 

 mezzo ausiliario diagnostico, e non devono mai essere tralasciate. 



Stabilita la presenza del gruppo coli-tipo e fatta la diagnosi differenziale di specie, 

 conviene determinare il titolo, perchè questo è un criterio importantissimo. 



A questo scopo serve il metodo delle culture per diluzione in substrati liquidi, e meglio 

 di tutti i brodi acidi Vi ncent-Pariett i e quello di Barziekow, Smith, Savage, 

 il siero di latte Petrusky. 



Per le prime prove bisogna adoperare diverse quantità di acqua (cmc. 100 - 50 - 

 20-10-1) cui si aggiungono quantità pressapoco corrispondenti di brodi. 



Si può così avere un primo criterio del grado dell'inquinamento a seconda dell'intor- 

 bidamento, fermentazione e variazione di colore o meno dei brodi. Avuto così due estremi, 

 si fanno diluzioni intermedie e si può stabilire il titolo esatto, o per lo meno entro limiti 



