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sime preparazioni, le coppie, per avere il numero di coniuganti per inni. e. e per cento 

 individui complessivi. L' uccisione degli individui da contare si ottiene coila massima como- 

 dità capovolgendo per alcuni secondi la goccia, sopra ad una boccia aperta di acido osmico. 



Per avere condizioni di temperatura costanti, ho tenuto tutti i recipienti cogli Infusori 

 in un termostato, intorno a 25°. 



L' alimento, costante anch' esso, Io ho estratto da un sacco di fieno magro, con acqua 

 distillata; l'estratto, concentrato a bagnomaria, diviene, raffreddandosi, friabile, e lo ho 

 ridotto in polvere impalpabile, ottenendone poco meno di cento grammi. Naturalmente non 

 è con questo eliminata l'acqua, cosa inutile per il mio scopo, mentre temevo di pro- 

 durre maggiori alterazioni nella sostanza, ponendola a disseccare completamente a tempe- 

 ratura elevata. Di questa polvere, pesai ogni tanto alcune prese, per discioglierla in ragione 

 del 2 per mille in vari liquidi; constatai infatti, per mezzo di alcuni esperimenti preli- 

 minari, che questa dose è ben adatta per un intenso sviluppo dei Criptochili. 



Gli esperimenti dunque consistono neh' allevare questi Infusori neh' estratto disciolto 

 al 2 °/ 00 in acqua distillata, oppure in altre soluzioni saline. Nel primo caso sono presenti 

 i sali dell'estratto solamente; nel secondo caso, anche quelli aggiunti. Pensai dapprima 

 alla eventuale necessità di dializzare la soluzione dell' estratto, per allontanare gran parte 

 dei sali in esso contenuti; ma, come presto vedremo, ciò non fu necessario, perchè le 

 coniugazioni non si formano o si formano in ben scarsa misura nelle soluzioni acquose 

 semplici, dell' estratto. Ne d' altra parte, qualunque preparato naturale od artificiale si 

 voglia adoprare per la coltivazione degli Infusori, si può pretendere di fare liquidi cultu- 

 rali privi completamente di sali : ciò impedirebbe lo sviluppo degli Infusori medesimi ; il 

 problema da risolvere non è quello, anche troppo facile, di porre gli Infusori in un 

 ambiente nel quale essi muoiano, bensì quello di porli in due ambienti, capaci di farli 

 rigogliosamente sviluppare, ma tali che in uno si formino coniugazioni, neh' altro no. Ora, 

 dal momento che la soluzione di estratto, in acqua distillata, permette un buono sviluppo, 

 e quasi senza coniugazioni, è inutile stare a cercare altro da questo lato. 



I sali adoperati sono stati disciolti in concentrazione N/3 o più diluiti secondo i casi, 

 facendo soluzioni volumetriche in palloncini tarati, colla sostanza anidra. Per preparare 

 i vasetti di cultura - tutti della stessa grandezza, con diametro interno di cm. 5,5 circa, 

 e con coperchio non a tenuta - unisco 5 crac, di soluzione di estratto all' 1 "/„, preparata di 

 fresco, con qualche cm.c. di soluzione salina, secondo la concentrazione cui si deve giun- 

 gere, e 1 cine, o anche meno, di una cultura precedente, il tutto fino al volume di 

 25 cine; qualche volta ho invece preparato a 25 cmc. di liquido culturale fresco, aggiun- 

 gendovi poi, dopo averlo versato nel vasetto, un poco di una cultura precedente. 



Le determinazioni numeriche degli Infusori le ho fatte nei primi esperimenti una volta 

 ogni 24 ore, negli ultimi, 3 volte ogni 24 ore. Le condizioni tecniche speciali di alcuni 

 esperimenti, verranno descritte più avanti, volta per volta. 



Serie VI. Tomo VI 1908-09. 61 



