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B - Vaccinazionr con colture artificialmente attenuate a mezzo del calore. 



Nello studio della possibile trasformazione in vaccino delle colture virulente, ho vo- 

 luto sperimentare dapprima Fazione delle alte temperature, sia perchè queste sono molto 

 facili a regolarsi, sia perchè i precedenti esperimenti mi avevano istruito sullo indeboli- 

 mento che esse effettivamente subiscono per effetto del calore, specie quelle che proven- 

 gono da stipiti meno attivi (Gr. I, Gr. IV). Infatti io ho trovato in un mio precedente 

 studio (1) che, per uccidere uria cavia, raramente occorre ripetere l'iniezione, quando la 

 coltura sottoposta per '/, ora alla temperatura di 100° proviene da materiali ricavati di- 

 rettamente dall'uomo; e che invece per aversi l'esito letale di regola bisogna ripetere 2-3 

 e perfino 4 volte l'iniezione, quando la coltura sottoposta alla alta temperatura deriva da 

 stipiti che vivono da tempo allo stato saprofitico (Gr. I, Gr. IV) e che verosimilmente 

 sono assai più deboli, assai più vulnerabili dei precedenti. 



Ed è appunto di questi due ultimi stipiti che ci siamo valsi negli esperimenti seguenti, 

 in cui la coltura in agar di 20-24'' era ripresa con acqua salata e tenuta 1 ora a 90° a 

 bagno maria o '/, ora a 100° prima d'iniettarla sotto la pelle della cavia. 



In una prima serie di ricerche, per provare il valore di questi vaccini, abbiamo voluto 

 espressamente limitare ad una od a poche le iniezioni vaccinanti, e fare la prova della 

 avvenuta immunizzazione nelle condizioni più favorevoli, col saggiare la resistenza acqui- 

 stata dallo animale contro la stessa coltura che aveva servito per la vaccinazione. 



Ma purtroppo dovemmo accorgerci ben presto che le colture tenute 1 ora a 90°, 

 anche quando non hanno destato alcun fenomeno o determinarono solo fenomeni di poca 

 importanza e molto transitori, non sono per nulla atte a vaccinare, almeno nelle condizioni 

 da noi provate, in cui cioè si fecero al massimo due iniezioni vaccinanti e si lasciò pas- 

 sare fra queste, e fra la vaccinazione e l' iniezione di prova, una distanza che va da 1 a 

 3 mesi circa. Anzi sembra che in questi casi, per effetto delle iniezioni di colture atte- 

 nuate a mezzo del calore (1 ora a 90°), sia aumentata la recettività dell'animale che 

 muore più sollecitamente del consueto. 



Così morì in 41 giorni una cavia che due mesi prima della iniezione di una coltura 

 virulenta (Stip. Gr. I), aveva avuto una iniezione vaccinante con la stessa coltura tenuta 

 un'ora a 90°. 



Egualmente soccombette in 34 giorni un'altra cavia iniettata con coltura virulenta 

 (Stip. Gr. IV), che aveva avuto precedentemente due iniezioni vaccinanti con la medesima 

 coltura sottoposta per un'ora alla temp. di 90°, alla distanza di due mesi l'ima dall'altra, 

 e con l'intervallo di circa tre mesi fra la seconda iniezione vaccinante e quella dì prova. 



Anche Je colture tenute V, ora a 100° a bagno-maria, poco valgono per la vaccina- 

 zione se le iniezioni vaccinanti sono in piccol numero ed assai ravvicinate fra loro e con 

 la successiva iniezione virulenta. 



(1) Tizzoni — Sulla resistenza alle alte temperature dello agente specifico della pellagra — 

 (Streptob. Pellagrae, T.). Bollettino d. Ministero di Agricoltura ecc. Anno X, Ser. C, Fase. 9. 

 Sett. 1911. 



