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TECNICA 



Piccoli pezzettini di testicolo freschissimo venivano messi nel liquido fissatore. 

 Ho sperimentate tutte le soluzioni le più reputate, per attenermi poi a quella che 

 mi avesse dato i migliori risultati. Buoni preparati si ottengono fissando nel liquido 

 di Kleinenberg, di Carnoy, sublimato corrosivo in soluzione acquosa satura, in 

 una miscela cromo-acetica (acido cromico 1 °/ p. 25, acido acetico ce. 50, acqua 

 p. 25) molto raccomandata da Ziegler (Die Technik der histologischen Untersu- 

 chung). Meno adatti sono il liquido di Miiller e 1' alcool. A gran pezza mi- 

 gliore di tutti i suddetti liquidi è la miscela di Flemming , e con questo ho fissato 

 la maggior parte del materiale impiegato nelle mie ricerche. Pezzi piccolissimi 

 venivano messi in una quantità piuttosto abbondante di liquido di Flemming, e 

 dopo 3-4 giorni lavati per 48 ore sotto un filo d' acqua. Durante la fissazione e 

 la lavatura tenevo i pezzi all' oscuro. Successivamente i pezzetti venivano trattati 

 come segue : alcool comune ed acqua in parti eguali ; alcool comune ; alcool asso- 

 luto ; cloroformio sopra il quale era versato dell' alcool assoluto, cosichè i pezzi 

 galleggiavano nel cloroformio ed erano ricoperti dall'alcool; quando toccavano il 

 fondo sostituivo nuovo cloroformio senza alcool ; poi per qualche tempo li tenevo 

 in cloroformio nel quale era sciolta della paraffina a saturazione, infine passavo ì 

 pezzi nella paraffina sciolta, tenendo la temperatura fra i 45 e 50 gradi. Le sezioni 

 venivano fissate sul porta-oggetti colla miscela di Meyer (albume e glicerina in 

 parti eguali), colorate collo saffranina di Pfitzner e montate in balsamo. H metodo 

 di Podwyssozki, eccellente per vedere le figure cariocinetiche , non l'ho trovato 

 buono ed applicabile con utilità, nel mio caso dove mi interessava di vedere i 

 rapporti reciproci delle diverse parti e non i nuclei soli. Una buonissima colorazione 

 si ha trattando prima il preparato colla ematossilina di Flemming (o di Delafield) 

 poi con una soluzione acquosa 1 °/ Q di nigrosina. A questo modo si colora assai 

 bene il protoplasma. Una elezione speciale per la cromatina l' ha il carmino di 

 Cuccati (Zeitschrift f. Mik. Anat. Bd. IV, p. 50, Jhg. 1887) a cui si faccia seguire 

 1' azione della saffranina. Con quest' ultima colorazione non si vede affatto il pro- 

 toplasma delle cellule di Sertoli; spiccano benissimo i nuclei. 



Ho preferito il metodo di inclusione in parafina a quello dell' inclusione in 

 celloidina, perchè le sezioni riescono più sottili, e ne è più facile il successivo trat- 

 tamento. Le figure cariocinetiche e le cellule vengono perfettamente conservate 

 nella loro integrità. 



