SÉANCE DU 19 FÉVRIER. 19 



COLORANT BLEU. COLORANT ROUGE. 



Bleu de Prusse soluble 1 gramme, Dissoudre 0,50 centigrammes d'alun 



acide oxalique 0,25 centigrammes, daus 10 grammes d'eau et y ajouter : 



Laisser agir quelques heures avec 0,50 centigrammes de safranine 



très peu d'eau et ajouter : dissoute dans 10 grammes d'alcool 



Eau pure 100 grammes. Filtrer. pur. Filtrer. 



L'objet que l'on voudra préparer pour l'étude sera, selon 

 sa nature, trié, désagrégé, ou coupé au microtome en tran- 

 ches très minces. — On le lave à l'eau distillée avant de le 

 tremper dans le liquide bleu, où on le laissera 5 à 10 minutes 

 suivant la consistance plus ou moins molle de l'objet ou le 

 plus ou moins d'épaisseur de la coupe. Lorsque faction de 

 ce colorant a donné une teinte bleue suffisante, il faut laver à 

 grande eau; prenant pour cela de l'eau distillée ou de l'eau 

 bouillie et filtrée (donc sans calcaire), ceci afin d'éviter la 

 formation de granulations d'oxalate de chaux. Sans cette pré- 

 caution il y aurait formation de ce sel en cristaux très ténus 

 et pulvérulents qui resteraient adhérents au tissu organique 

 et gâteraient la netteté visuelle au microscope. 



L'objet est ensuite plongé dans la solution de safranine 

 alunée qu'on laisse agir pendant un temps qui variera (pour 

 les raisons déjà citées) de 5 à 10 minutes. Ce colorant opère 

 une sélection spéciale et n'agit pas sur les détails déstructure 

 déjà teintés en bleu. Le lavage se fait à l'alcool faible. La 

 double coloration est dès lors achevée et l'étude microsco- 

 pique peut se faire immédiatement en prenant soit de Veau 

 soit de la glycérine comme médium. 



Mais si l'on veut conserver et monter ces objets colorés 

 sous la forme de préparations microscopiques, il faut alors les 

 laver d'abord avec de l'alcool faible, puis avec de l'alcool 

 absolu, afin d'enlever les moindres traces d'eau qui rendraient 

 la préparation plus ou moins trouble ou laiteuse. Une fois cet 

 alcool écoulé, on ajoute de l'essence de girofle (peu colorée). 

 Cette essence doit être ajoutée avant que tout l'alcool soit 

 évaporé et, si c'est une coupe, il ne faut pas la laisser sécher; 

 car de petites bulles d'air pourraient alors s'introduire dans 

 'intérieur des cellules et il serait difficile de les en déloger. 



