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A Ciona intestinalis, mata-se lentamente deixando cahir na agua 

 do mar em que está estendida, algumas gottas da mistura chromo- 

 acetica, n.° 2 quando o animal está morto, o que succede proxima- 

 mente 1 passada meia hora, colhe-se pelo orifício anterior para evitar 

 que se esvasie a agua que contém, e passa-se para o acido chromico 

 a l°/o, injectando-o também com uma pipeta no interior do animal; 

 passa- se depois da mesma maneira para o álcool fraco. 



Algumas Ascidias (Ascidia e Èhopalea) podem matar-se com os 

 orifícios abertos da seguinte maneira: collocam-se n'um vaso bastante 

 alto, cheio d'agua do mar de modo que a superfície do liquido fique 

 4 a 5 centimetros, pelo menos acima do animal, e vertem-se, lenta- 

 mente, algumas gottas de acido chromico a 1 °/o, de maneira que for- 

 mem uma ligeira camada á superfície da agua; o acido chromico es- 

 palha-se pouco a pouco por toda a massa liquida matando os animaes 

 ao cabo d'um tempo que varia entre doze e vinte quatro horas. E sem- 

 pre conveniente antes de endurecer a ascidia com acido chromico sa- 

 ber se está morta, e se não está, junta-se novamente uma pequena 

 quantidade de acido chromico. 



Para as Molgula, Poli/carpa, Rhopalea e Chevreulius (Rhodo- 

 soma), é necessário deixal-as doze horas em hydrato de chloral a 

 l 00 /oo, matal-as depois com a mistura chromo-acetica n.° 2, e endu- 

 recel-as em seguida por pouco tempo com acido chromico a l 00 /oo. 



A Cinthya e Styela adormecem- se durante vinte e quatro horas 

 com hydrato de chloral a 2 00 /oo e tratam-se depois como as espécies 

 precedentes. Acontece ás vezes que a C. papillosa contrahe muito o 

 corpo ao collocal-a no hydrato de chloral a 2 00 /oo; deve- se então tor- 

 nar a collocar na agua do mar corrente e repetir immediatamente a 

 operação com hydrato de chloral l 00 /oo. 



Ascidias compostas. — As formas gelatinosas, por exemplo, Botri- 

 lideos, Pólycyclus, Circinalium e Fragarium, deixam-se durante duas 

 horas em hydrato de chloral a l 00 /oo e matam-se vertendo sobre a co- 

 lónia sublimado concentrado quente; passam-se em seguida para o 

 acido chromico a 72% no < Í ua ^ permanecem uma meia hora. 



A Distaplia depois de narcotisada com o chloral mata-se com a 

 mistura chromo-acetica, n.° 2, e passa-se depois directamente para o 

 álcool fraco. 



A Diazona violácea deve-se conservar doze horas em hydrato de 

 chloral a 2 00 /oo, e depois de morta e endurecida trata-se como os Bo- 

 trilideos, com a differença que se deve injectar o liquido com uma pi- 

 peta em cada animal. 



O Leptoclinum e outras formas de certa consistência passam-se 

 directamente de chloral para o álcool. 



1 O dr. Garbini no seu Manual de Microscopia, p. 372, diz que para matar 

 as ascidias por este methodo (visto por elle na Estação Zoológica) requerem-se 

 quatro ou cinco dias. 



