Ueber ein Härtung und Färbung vereinigendes Verfahren etc. 45 



doch bei minder guter Fixirung, etwas — immerhin sind aber noch 

 drei Operationen, Härten in starkem, Färben in stark wasserhaltigem 

 und Wiederauswaschen mit starkem Alkohol nothwendig. Der absolute 

 Alkohol hat dabei als Härtungsmittel bei Algen noch zwei weitere Nach- 

 theile. Erstens ist es oft nicht möglich, von den Objecten, etwa im 

 Schlamm lebenden einzelligen Algen das Wasser vor dem Zusatz des 

 Härtungsmittels so vollständig zu entfernen, dass der Alkohol nicht 

 schon im Einwirkungsmoment verdünnt ist, zweitens giebt derselbe mit 

 Meerwasser lästige Niederschläge. Gerade die beste wässrige Härtungs- 

 flüssigkeit aber, die mir für Algen bekannt ist, concentrirte Pikrinsäure- 

 lösung, giebt, wie ebenfalls schon Flemming 1 ) betont, bei nachheriger 

 Saffraninfärbung sehr unsichere Erfolge. 



Was die Tinction mit Hämatoxylin, oder richtiger mit Hämatein- 

 Ammoniak 2 ) anbetrifft, so ist, wofern Chromsäure oder Pikrinsäure zum 

 Fixiren benutzt wurde, ebenfalls sorgfältigstes Auswaschen vor dem 

 Zusatz des Farbstoffs nöthig, da derselbe für freie Säure äusserst em- 

 pfindlich ist. Ausserdem ist die genannte Substanz an sich sehr leicht 

 zersetzbar, was manche Missstände herbeiführt und wohl auch verur- 

 sacht, dass, wie Flemming 3 ) fand, auch die besten Hämatoxylin-Prä- 

 parate selbst in Harzeinschluss allmälig verblassen. 



Unter diesen Umständen habe ich mich bemüht, einen Farbstoff 

 aufzufinden, der auch in sauren Lösungen gut und rein tingirt, so dass 

 er gleichzeitig mit der fixirenden Säure zugesetzt werden kann. Yon 

 Chromsäure und Osmium säure sah ich dabei ab, da sie durch orga- 

 nische Substanzen, also wohl auch durch organische Farbstoffe zu leicht 

 reducirt werden, und beschränkte mich auf Versuche mit Pikrinsäure. 

 Nachdem diese, wie ich glaube, einigermassen erfolgreich gewesen sind, 

 erlaube ich mir bei der grossen Arbeitsmenge, welche augenblicklich 

 auf das Studium des plasmatischen Zellleibs verwandt wird, mein Ver- 

 fahren schon vor der Veröffentlichung der betreffenden Einzelunter- 

 suchung hier mitzutheilen und möchte bitten es bei verschiedenen Ob- 

 jecten zu erproben. 



Der angewandte Farbstoff ist das Nigrosin (Qual. I.), welches ich 

 von Trommsdorff in Erfurt bezogen habe. Dasselbe löst sich leicht 

 in Wasser mit tief violettblauer Farbe, langsamer wird es von gewöhn- 

 lichem Spiritus aufgenommen — sehr starker Alkohol löst nur bei län- 

 gerem Stehen kleine Mengen, so dass das Nigrosin in ganz wasser- 

 freiem Alkohol wohl unlöslich sein dürfte. Die durch Vermischen einer 

 concentrirten wässrigen Pikrinsäurelösung mit einer kleinen Menge wäss- 

 riger Nigrosinlösung hergestellte tief olivengrüne Flüssigkeit tödtet 



1) Archiv u. s. w. S. 328. 



2) Vgl. Schmitz in Sitzungsber. d. Niederrhein. Gesellsch. f. Natur- u. Heil- 

 kunde, 1880, S. 160. Flemming, Zellsubstanz, S. 382. 



3) Archiv u. s. w. S. 328. 



