Ueber den mikrochemischen Nachweis von Nitraten etc. 151 



Da von den Chemikern 1 ) in letzter Zeit Diphenylamin oder Brucin 

 zum Nachweis sehr kleiner Mengen von Nitraten und Nitriten im 

 Brunnenwasser mit schönem Erfolge verwendet werden, so versuchte 

 ich die beiden Reagentien in die Histochemie einzuführen; schon 

 wenige Versuche liessen erkennen, dass diese, ganz besonders aber das 

 Diphenylamin, die Gegenwart von Nitraten od er Nitriten in mikroskopischen 

 Schnitten durch eine auffallende Farben* eaktion anzeigen. Die an- 

 fängliche Befürchtung, dass die Reaktion durch andere organische Stoffe 

 der Zelle gestört werden könnte, erwies sich als unbegründet. 



R e actio n mit Diphenylamin. Als Reagenz leisteten mir die 



besten Dienste Lösungen von — ^r bis -jfr9 r Diphenylamin in 10 cem rei- 

 ner Schwefelsäure. Solche Lösungen sind vollkommen klar und fast farblos. 

 Bei der Prüfung frischer Schnitte ist es, wie ich mich vielfach über- 

 zeugt habe, nicht gut mit konzentrirteren Lösungen zu arbeiten, da in 

 diesem Falle das Diphenylamin beim Zusammentreffen mit Wasser 

 (Zellsaft) herausfällt, wodurch die Reaktion unterbleibt oder nur sehr 

 undeutlich hervortritt. Anders ist es jedoch, wenn man einen am 

 Objektträger eingetrockneten Schnitt, in welchem also die etwa 

 vorhandenen Nitrate in fester Form vorhanden sind, zu untersuchen 

 hat; da empfiehlt es sich, sehr konzentrirte Lösungen anzuwenden. 

 Bringt man einen Tropfen von dem Reagenz auf einen ein salpeter- 

 saures oder salpetrigsaures Salz enthaltenden Querschnitt, so tritt eine 

 tiefblaue Färbung auf, welche je nach dem grösseren oder ge- 

 ringeren Nitrat- oder Nitritgehalt längere oder kürzere Zeit andauert, 

 um schliesslich zu verschwinden oder ins Braungelbe überzugehen. 

 Sind nur Spuren von den genannten Körpern vorhanden, so erhält man 

 mitunter keine Reaktion, wohl aber dann, wenn man den Schnitt am Ob- 

 jektträger austrocknen lässt und hierauf einen Tropfen recht kon- 

 zentrirte Diphenylaminlösung hinzugiebt: es tritt alsbald deutliche Blau- 

 färbung ein, die sowohl makro- als auch mikroskopisch sichtbar wird. 

 Bei der Untersuchung von Schnitten ist es vortheilhaft, soviel von dem 

 Reagenz auf dieselben zu bringen, dass sie vollständig untergetaucht 

 sind. Dringt das Diphenylamin recht gleichmässig von allen Seiten 



1) A. Wagner, Erkennung und Bestimmung der Nitrate im Brunnenwasser. 

 Zeitschrift f. Chemie, herausgeg. v. Fresenius, Jg. 20, p. 329. Zum Beweise da- 

 für, wie empfindlich die Reaktion mit Diphenylamin ist, führe ich aus Wagner's 

 Arbeit folgende Tabelle an: 

 1 cem einer Lösung von 



1 Salpeter in 10 000 Wasser gab starke sofortige Reaktion. 

 100000 „ 



200000 „ „ deutliche Reaktion nach kurzer Zeit. 

 300000 „ „ schwache „ „ längerer Zeit. 



600000 „ - keine sichere Reaktion. 



