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L' importanza della seconda condizione, poi, apparisce chiara quando si 

 ricorda che le oscillazioni nella tossicità di una cultura del tetano sono 

 abbastanza larghe, e che per tali oscillazioni, specie se non si realizzano 

 scrupolosamente tutte le condizioni che saranno dette fra breve, la tossi- 

 cità di una cultura può essere anche 5 volte minore. 



Per soddisfare la prima condizione, di possedere per le iniezioni di 

 rinforzo una cultura fornita del grado massimo di tossicità, occorre aver 

 riguardo all' ambiente sotto il quale la cultura è fatta sviluppare, alla qua- 

 lità del substrato nutritivo e all' età della cultura. 



Riguardo all'ambiente, io do la preferenza al vuoto, perchè le culture 

 al vuoto, come ho già detto, sono assai più tossiche di quelle sotto idro- 



geno. 



Rapporto alla qualità del terreno di nutrizione sarebbe senza dubbio 

 da prescegliersi il sangue di coniglio, solo o aggiuntavi sopra della gela- 

 tina, come quello nei quale il bacillo del tetano produce il massimo di 

 sostanza tossico-vaccinante ; ma siccome queste culture in sangue deter- 

 minano una più forte reazione locale, e sono fluidificate completamente 

 solo dopo un tempo abbastanza lungo, cosi nel rinforzo dei miei animali 

 vaccinati io ho dovuto, invece, accordare la preferenza alle culture fatte 

 sviluppare in gelatina, avente questa una composizione determinata e sem- 

 pre costante, che é quella riconosciuta migliore per la formazione nella 

 cultura stessa di una maggior quantità di sostanza tossica. 



Finalmente, riguardo all' età, si conosce che le culture del tetano, dopo 

 essere nel loro sviluppo arrivate al grado massimo di velenosità, che rag- 

 giungono al 7 m0 10™° giorno dall' innesto, col decorrere del tempo , e spe- 

 cialmente se lasciate nel termostato a 35° C, perdono una parte del loro 

 potere tossico; ma arrivate ad un certo grado si mantengono poi inalterate 

 o quasi, sopratutto se sono conservate al vuoto, all' oscuro e in ambiente 

 fresco. 



Nel rinforzo dei miei animali mi sono servito di culture di età molto 

 differente, da 4-6 giorni fino a 4-8-10 mesi. 



Nella lunga esperienza che io ho potuto fare a questo proposito sono 

 arrivato a convincermi che il vaccino si forma nelle culture abbastanza 

 presto, e che una volta formato poco a poco diminuisce di quantità, per 

 influenza della luce, del calore e dell' invecchiamento, precisamente come 

 avviene per riguardo alla sostanza tossica. Perciò le culture abbastanza 

 giovani hanno il massimo potere vaccinante, e sono quindi da presce- 

 gliersi nel rinforzo come quelle che innalzano l' immunità al grado più 

 elevato. 



Infatti nei rinforzi in cui erano state adoprate nei miei cavalli culture 

 di 6 giorni io ho avuto il massimo della potenza del siero, che ha rag- 



