Über den Nachweis der Glyoxylsäure usw. 139 



kühlten Vorlage enthaltenes Wasser mit etwas aufgeschwemmtem Calcium- 

 carbonat passieren mußten. Dann wurde das Destillat vorsichtig konzentriert. 

 In derselben Weise wurde Harn destilliert, dem 10- bis 20 mal mehr Glyoxyl- 

 säure zugesetzt war, als man nach der Methode von Schloss (Entfärben 

 mit Tierkohle und Zerstörung der Nitrite mit Schwefelsäure) deutlich nach- 

 weisen konnte. Im Destillat wurde immer nur eine sehr schwache oder 

 keine Indolreaktion gefunden. Der Rückstand gab aber fast immer noch 

 eine deutliche, manchmal sogar starke Reaktion. 



Der Nachweis der Glyoxylsäure durch Destillation ist also hei 

 einer so niedrigen Konzentration, wie sie Harn und andere tierische 

 Flüssigkeiten darbieten, nicht ausführbar. Dasselbe gilt nach 

 Eppinger und Dakin von jenen Methoden, die auf der Über- 

 führung der Glyoxylsäure in Oxalsäure oder Allantoin und auf der 

 Reaktion mit Phenylhydrazin beruhen. 



Von mir unternommene Versuche, ein geeignetes Extraktions- 

 mittel für Glyoxylsäure zu finden, schlugen fehl, da niedrige 

 Alkohole, Äther, Acetessigester schon selbst oft Spuren von Gly- 

 oxylsäure enthalten, glyoxylsäurefreie Stoffe aber, wie Benzol, 

 Toluol usw. die Glyoxylsäure zu wenig aufnehmen. 



Hingegen wurde folgende Methode geeignet gefunden : Mög- 

 lichst viel von dem die Indolprobe zeigenden Harn ( 1 / 2 bis 1 Liter) 

 wird mit Tierkohle entfärbt und mit Kalkhydrat ausgefällt. Das 

 von überschüssigem Kalk mit Kohlensäure befreite Filtrat wird 

 mit Essigsäure neutralisiert und im Vakuum auf 100 bis 150 ccm 

 eingedampft. Dann wird mit einem kleinen Überschuß von basi- 

 schem Bleiacetat gefällt. (Manchmal ist ein kleiner Zusatz von 

 Ammoniak zur vollständigen Fällung nötig.) Der Bleiniederschlag 

 wird mit nicht viel Wasser gewaschen, mit Schwefelsäure zerlegt, 

 das Filtrat mit Calciumcarbonat neutralisiert, in vacuo auf ein 

 kleines Volumen eingedampft, der abgeschiedene Gips abgesaugt, 

 mit wenig kochendem Wasser ausgezogen und die ganze Flüssig- 

 keit im Vakuum auf ein kleines Volumen (30 bis 40 ccm) ein- 

 geengt. Darauf kann die Glyoxylsäure in der Flüssigkeit durch 

 Überführung in Oxalsäure oder in die Amidoguanidinverbindung 

 (Dakin) nachgewiesen werden. In letzterem Falle empfiehlt es 

 sich, die Flüssigkeit im Vakuum bis zur Trockne einzudampfen, 

 zur Entfernung von Chlorcalcium mit Alkohol zu extrahieren, 

 den Rückstand in wenig heißem Wasser zu lösen und mit einer 

 konzentrierten Lösung von Amidoguanidinnitrat aufzukochen. Nach 

 1- bis 2tägigem Stehen in der Kälte, manchmal erst in einer Kälte- 

 mischung, kristallisiert die Amidoguanidinglyoxylsäure in schönen 

 Nadeln vom Schmelzpunkt 155 bis 156° aus. 



