Über die fermentative Veränderung der Glyoxylsäure durch Organbrei. 217 



Ein nur mit Toluol extrahiertes Leberpulver von einer anderen 

 Darstellung erwies sich von vornherein als wenig wirksam. 



Hingegen büßte ein Niederschlag, welcher durch Fällung der 

 Leberflüssigkeit mit dem 10 fachen Volumen Aceton erhalten und 

 rasch getrocknet worden war, nur langsam an Wirksamkeit ein. 

 Er war noch nach einigen Monaten aktiv. 



2. Zur Charakteristik der Glyoxylase. 



Da ich bei den Versuchen, das Ferment zu isolieren, immer 

 nur Präparate erhielt, welche von vornherein vier- bis achtmal 

 weniger wirksam waren als die frische Leber und beim Auf- 

 bewahren noch weiter an Wirksamkeit verloren, so habe ich die 

 Eigenschaften der Glyoxylase au frischer Rindsleber zu studieren 

 versucht. 



Die ganz frische Rindsleber wurde von gröberen Stücken 

 Bindegewebe befreit, in der Fleischhackmaschine zerkleinert und 

 mit Quarzsand verrieben. Mit dem gleichen Volumen physiologi- 

 scher Kochsalzlösung oder Ringerscher Lösung gemischt zerstörte 

 die Leber das ihr im Verhältnis 4 : 1000 des Gewichtes zugefügte 

 glyoxylsäure Natron bei 37° in 4 Stunden vollständig. Fast immer 

 war schon nach 1 bis l x / 2 Stunden diese Menge Glyoxylsäure bis 

 auf Spuren verschwunden. (Um eine bessere Mischung des Leber- 

 breies mit dem glyoxylsauren Natron zu ermöglichen, wurde 

 physiologische Kochsalzlösung oder Ring er sehe Lösung zugefügt.) 

 Nach abgeschlossener Digestion bei 37 bis 40°, während welcher 

 die Flüssigkeiten mehrmals durchgeschüttelt wurden, wurde das 

 Eiweiß durch Zusatz von 1 / 3 bis 1 / 2 Volumen 24 proz. Schwefel- 

 säure ausgefällt. 



Scbloss bat empfohlen, die Ausfällung mit konzentrierter Trichlor- 

 essigsäure auszuführen. Es scheint aber, daß die Tricbloressigsäure in dieser 

 Beziehung keine Vorzüge vor der Schwefelsäure hat. Bei der Koagulation 

 mit Trichloressigsäure bekommt man meistens trübe, oft fast milchige 

 Lösungen, während man nach der Ausfällung mit Schwefelsäure durch Fil- 

 tration viel öfter klare, oder fast klare Lösungen erhält. Außerdem bildet 

 sich bei der Unterschichtung mit konzentrierter Schwefelsäure in der Tri- 

 chloressigsäure enthaltenden Lösung eine Schicht von braunen, beim Vor- 

 handensein von Glyoxylsäure braunroten oder roten Tropfen, welche bei 

 geringen Mengen Glyoxylsäure die Abschätzung erschweren. Bei Ausfällung 

 mit Schwefelsäure fehlt diese Erscheinung. 



Nach Koagulation mit Schwefelsäure und Filtration wurde 

 Indollösung zugefügt, die Flüssigkeit mit konzentrierter Schwefel- 

 säure unterschichtet und mit den Kontrollproben verglichen. Zur 



