250 F. Rogozinski, 



3. Der zeitliche Ablauf der Peptonbildung. 



Um mich über die Natur der aus Blutalbumin bei längerer 

 Trypsinwirkung entstehenden Produkte, sowie über ihr Verhältnis 

 zu dem von E Fischer und E. Abderhalden 1 ) beschriebenen 

 polypeptidähnlichen Stoff zu orientieren, habe ich folgenden Ver- 

 such ausgeführt, wobei ich die Methodik teilweise, um sie der von 

 Fischer benutzten näher zu bringen, umgeändert habe. 



200 g Blutalbumin und 20 g Pankreatin wurden unter Zusatz 

 von 2 ccm Ammoniak und etwas Chloroform in 2 Liter Wasser 

 gelöst und unter Toluol bei 40° stehen gelassen. Das Verdauungs- 

 gemisch wurde in den ersten Tagen mehrmals täglich, später 

 einmal jeden Tag gründlich durchgeschüttelt. Die Verdauung 

 dauerte 30 Tage. Nach dieser Zeit wurde die Flüssigkeit, die 

 immer noch eine deutliche Biuretreaktion gab, auf dem Wasser- 

 bade erhitzt, wobei sich ein ziemlich beträchtliches Koagulum ab- 

 schied. Das klare Filtrat davon gab nur schwache Biuretreaktion. 

 Es wurde nunmehr unter Toluol für 3 Tage in den Eisschrank 

 gestellt, wobei eine reichliche Ausscheidung von Tyrosin erfolgte. 

 Das Filtrat vom Tyrosinniederschlag wurde auf 4 Liter gebracht, 

 mit Salzsäure versetzt, bis der Gehalt daran 5 Proz. betrug, und 

 mit einem Überschuß von Phosphorwolframsäure gefällt. (Die 

 Verdünnung hatte den Zweck, ein etwaiges Mitausfällen von 

 Phenylalanin zu verhüten.) Der Niederschlag wurde möglichst 

 abgepreßt, dann durch Zusatz von Alkali gelöst und die stark (auf 

 8 Liter) verdünnte Lösung, um die noch anhaftende Mutterlauge 

 möglichst zu entfernen, durch Salzsäure unter Zugabe von über- 

 schüssiger Phosphorwolframsäure zum zweiten Male gefällt. Der 

 möglichst scharf abgesaugte und abgepreßte Niederschlag wurde 

 fein zerrieben und 12 Stunden mit überschüssigem Barythydrat 

 geschüttelt, die von Baryumphosphorwolframat abfiltrierte Lösung 

 nach Entfernung des Baryts mit Schwefelsäure im Vakuum auf 

 1 Liter eingeengt und mit festem Ammonsulfat gesättigt. 



Die salzgesättigte Flüssigkeit gab auch beim Stehen keinen 

 Niederschlag, ebensowenig bei Zusatz von salzgesättigten Lösungen 

 von Zink- und Kupfersulfat, mit salzgesättigter Eisenammoniak- 

 alaunlösung nur eine schwache, allmählich entstehende, nicht 

 filtrierbare Trübung. Sie wurde deshalb direkt mit salzgesättigter 

 Schwefelsäure augesäuert uud mit ebenso angesäuerter, salz- 

 gesättigter Lösung von Quecksilberjodidjodkalium ausgefällt. 



*) Zeitschr. f. physiol. Chem. 39, 81 ; 40, 215. 



