276 Kenji Takaki, 



die Extraktion mit immer gewechseltem Benzol bis zu 120 Stunden 

 fortgesetzt. 



Das Benzolextrakt war bernsteingelb bis braun gefärbt und 

 klar; es wurde durch ein dickes Filterpapier filtriert, über Nacht 

 stehen gelassen und dann nochmals filtriert. Dann wurde das 

 Benzol bis auf ein kleines Volum abdestilliert, der flüssige Rück- 

 stand durch ein gehärtetes Filter filtriert, bei 37° verdunstet und 

 im Vakuum über Schwefelsäure getrocknet. Der Rückstand dieses 

 Extraktes war schwarzbraun gefärbt und seine Beschaffenheit 

 wechselte je nach der Periode der Extraktion. Die ersten Extrakte 

 setzten einen ziemlich festen Rückstand ab, die Rückstände späterer 

 Extrakte waren mehr ölig. 



Zu den Injektionsversuchen wurden die von Lösungsmitteln 

 befreiten Rückstände in bestimmter Menge mit 10 bis 20ccm 

 0,9 proz. Kochsalzlösung und 0,1 proz. ISTatriumcarbonatlösung in 

 einer Reibschale emulgiert und den Versuchstieren — Kaninchen 

 — intraperitoneal eingespritzt. Am achten Tage nach der In- 

 jektion wurde das Serum auf seine hämolytische Wirkung unter- 

 sucht. 



Zum Nachweis der erzielten hämolytischen Wirkung wurden in allen 

 Versuchen 2 ccm einer 5 proz. Aufschwemmung von dreimal mit 0,9 proz. 

 Kochsalzlösung gewaschenen Pferdeblutkörperchen in der gleichen Kochsalz- 

 lösung benutzt. Behufs annähernder quantitativer Bestimmung bediente ich 

 mich zweier Verfahren. 



I. Die Mischung des Serums mit der Blutkörperchenaufschwemmung 

 wurde nach 2 stündigem Stehen bei 37° schnell von den Blutkörperchen 

 durch Zentrifugieren getrennt und der Farbenton der klaren Flüssigkeit in 

 kleinen, stets gleich weiten Reagenzgläschen im gelben Gaslicht gegen einen 

 weißen Hintergrund mit dem Rubinglas des Fleischischen Hämometers 

 verglichen. Die Flüssigkeit wurde, wenn nötig, verdünnt. Die Skalen- 

 einteilung, die mit dem Rubinglas verbunden ist, gestattete die Farben- 

 intensität der Lösung bequem zahlenmäßig festzustellen. Diese Methode 

 läßt, wenn man für den Vergleich die günstigsten Bedingungen wählt 

 (namentlich bei Betrachtung durch einen schmalen Schlitz), eine ziemlich 

 genaue, für den vorliegenden Zweck genügende Bestimmung zu. 



II. Die Serumblutkörperchenmischung wurde nach einstündigem Stehen 

 bei 37° 0, 24 Stunden im Eisschrank absitzen gelassen, dann wurde die über- 

 stehende Flüssigkeit von den abgesetzten Blutkörperchen durch Abgießen 

 getrennt und in kleinen Reagenzgläschen wie oben mit der Fleisch Ischen 

 Farbenskala verglichen. 



Ich halte nach meinen Erfahrungen das erstangeführte Verfahren für 

 zuverlässiger und habe davon in allen anzuführenden Versuchen, wo nichts 

 anderes bemerkt ist, Gebrauch gemacht. 



Zum Vergleich sei zunächst folgendes über die hämolytische Wirkung 

 des Kaninchenserums bemerkt. 



