334 Gustav Embden und Louis Michaud, 



näher zu besprechenden Ausnahmen kamen die Organe so frisch 

 wie -möglich zur Verarbeitung, Hundeorgane sofort nach Tötung 

 des Tieres, diejenigen von Schlachthaustieren so rasch, als es 

 die ziemlich erhebliche Entfernung des Instituts vom Schlachthaus 

 gestattete. 



Die Organe wurden mit der Fleischhackmaschine möglichst gut zer- 

 hackt, kleine Organe wie Milz und Niere vom Hunde, mit dem Wiege- 

 messer. Der gewonnene Organbrei wurde teils mit Rinderblut, teils mit 

 physiologischer Kochsalzlösung in bestimmtem Verhältnis versetzt und zu 

 gleichen, aliquoten Teilen dieser Mischung die gleiche Menge einer mög- 

 lichst neutral reagierenden Lösung von acetessigsaurem Natron hinzugefügt. 



Ein Teil wurde sofort mit der gleichen Menge Wasser und der 

 doppelten Menge Salzsäure von 2 Proz. und Quecksilberchloridlösung von 

 5 Proz. nach Schenck gefällt, während einer bestimmten Zeit in der Kälte 

 aufbewahrt, und in dem nach dieser Zeit gewonnenen Filtrate eine Aceton- 

 bestimmung nach Messinger-Hupper t vorgenommen. 



Die anderen, gleich großen Teile der Mischung wurden in sterilisierte 

 Pulverflaschen, die mit dicht schließenden Glasstopfen versehen waren, über- 

 führt. Sie verblieben unter häufigem Schütteln verschieden lange in einem 

 Wasserbade , dessen Temperatur auf 40° C gehalten wurde. Die Zeit des 

 Aufenthaltes im Wasserbade schwankte zwischen 15 und 90 Minuten. Nach 

 dieser Zeit wurden die dem Wasserbade entnommenen Flaschen in ver- 

 schlossenem Zustande auf 5 bis 15 Minuten in Eis gekühlt, um Aceton- 

 verluste beim Öffnen der Flaschen zu vermeiden. Dann wurden die Organ- 

 gemische genau in der gleichen Weise wie der sofort angesetzte Anteil 

 weiter verarbeitet ; insbesondere wurde darauf Bedacht genommen, daß von 

 der Fällung der Gemische mit Salzsäure und Sublimat bis zur Filtration bei 

 den einzelnen Bestimmungen desselben Versuches stets dieselbe Zeit 

 verging. 



Die Bestimmungen nach M essinger- Huppe rt wurden stets an mög- 

 lichst großen, innerhalb der einzelnen Versuche stets gleichen, aliquoten 

 Teilen des Filtrates angestellt, in den meisten Versuchen an 500 ccm. 



Die gewonnenen Werte wurden auf Acetessigsäure und auf die gesamte, 

 nach Fällung mit Salzsäure und Sublimat vorhandene Flüssigkeitsmenge 

 umgerechnet. Hierbei wurde der Ei weißnieder schlag vernachlässigt. 



In allen späteren Versuchen wurde das acetessigsäure Natron aus der 

 Pipette dem Inhalt der einzelnen Flaschen zugefügt. Diese Flüssigkeits- 

 menge war so gering, daß wir sie bei der Berechnung der Acetessigsäure- 

 menge auf die Gesamtflüssigkeit nicht zu berücksichtigen brauchten. 



Die Acetessigsäure wurde aus Acetessigester , der durch Schütteln mit 

 Baryumcarbonat in Wasser von sauren Beimengungen befreit war, dar- 

 gestellt. Die Verseif ung geschah durch Normal - Natronlauge in geringem 

 Überschuß. Nach 48 stündigem Stehen im Eisschrank wurden unverseifte 

 Reste von Acetessigester durch öfteres Schütteln mit Äther entfernt, und 

 die Flüssigkeit mit l / 10 -Normalsalzsäure genau neutralisiert. 



Nunmehr wurde der Äther, sowie der bei der Verseifung gebildete 

 Alkohol durch Destillation unter möglichst geringem Druck entfernt. Die 

 Temperatur des Heizwassers überstieg 29 bis 32° nicht. Hierbei mußte 



