

Darstellung und Eigenschaften des proteolyt. Leukocytenfermentes. 451 



Das Knochenmark wurde durch Auspressen von menschlichen Rücken- 

 wirbeln am Schraubstock leicht gewonnen. An Eiter verwandten wir teils 

 von Kokkenabszessen herstammenden, teils sterilen durch Terpentininjektion 

 beim Menschen gewonnenen, an polynukleären Leukocyten reichen Eiter. 



Darstellung des Fermentes. 



Die von uns angewandte Methode führte erheblich schneller 

 zum Ziel als das von Erben und Sc hu mm benutzte Verfahren 

 zur Gewinnung des Fermentes bei der Leukämie. Wir benutzen 

 die uns von früheren Untersuchungen her bekannte Tatsache, daß 

 hohe Temperaturen die Autolyse der ferm enthaltigen Organe außer- 

 ordentlich beschleunigen, so daß das Ferment nach Zugrundegehen 

 der Leukocyten schnell frei wird. Das Ausgangsmaterial wurde 

 deshalb stets erst 24 bis 48 Stunden der Autolyse im Brütschrank 

 bei 55° ausgesetzt und hierauf in folgender Weise verarbeitet. Das 

 betreffende Autolysat wurde zunächst mit der mehrfachen (ungefähr 

 fünffachen) Menge eines Gemisches von zwei Teilen Alkohol und 

 einem Teil Äther verrührt, um die fettartigeu Stoffe herauszulösen, 

 bzw. die eiweißartigen Verbindungen zu fällen. Nach eintägigem 

 Stehen wurde nitriert, der Rückstand zunächst zur Verdunstung von 

 Alkohol und Äther auf Ton ausgebreitet und dann mit einer ent- 

 sprechenden Menge (bei flüssigem Ausgangsmaterial mit etwa 

 1 / i Volumen) Glycerin und der gleichen Menge Wasser innig ver- 

 rieben, nach ein- bis zweitägigem Stehen im Dunkeln wurde auf 

 einem Büchn ersehen Trichter abgesaugt und das klare Filtrat 

 in die fünf- bis sechsfache Menge eines Alkoholäthergemisches 

 (2 : 1) unter Umrühren allmählich eingegossen. Der dabei ent- 

 stehende weißliche Niederschlag, welcher sich ■ allmählich an dem 

 Boden des Becherglases ziemlich fest ansetzt, wurde nach dem 

 Abgießen der darüberstehenden Alkoholätherlösung auf Ton ge- 

 bracht und im Vakuumexsiccator über konzentrierter Schwefelsäure 

 getrocknet. Dabei färbt er sich gelbbraun und geht nur, besonders 

 in dickeren Schichten, sehr allmählich in trockenen, zerreibbaren 

 Zustand über. Das so gewonnene Produkt, welches das Enzym 

 enthält, ist etwas hygroskopisch. Es löst sich beim Zerreiben mit 

 Wasser oder physiologischer Kochsalzlösung mit bräunlicher Farbe. 

 Die Verdauungskraft des erhaltenen Präparates wurde nach ver- 

 schiedenen Methoden geprüft. 



Yerdauungsproben. 



Bringt man Tröpfchen der Lösung auf eine Löffler-Serum- 

 Platte und setzt sie 24 Stunden einer Temperatur von 55° aus, 



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