Untersuchungen über die Hämolysinbildung. 265 



Versuchsserie Nr. 4. 



1. 0,05 ccm Ser. -f- Ochsenblut 



2. 0,05 „ „ -f 0,5 ccm NS -j- Ochsenblut ++44" 



3. 0,5 ., N -j- 0,05 ccm Ser. nach V, Stunde + 0,5 ccm N S 



-f- Ochsenblut 



4. 0,5 ccm N -\- 0,05 ccm Ser. nach % Stunde -\- 1 ccm N S 



-f Ochsenblut ++-f 



5. 0,5 ccm N -\- 0,05 ccm Ser. nach V 2 Stunde filtriert -j- 0,6 ccm NS 



4- Ochsenblut +44" 



6. 0,5 ccm N -j- 0,05 ccm Ser. nach % Stunde filtriert -\- 0,05 ccm Ser. 



+ 0,3 ccm NS -f- Ochsenblut 



7. 0,5 ccm N -|- 0,5 ccm N S nach l / 8 Stunde filtriert -j- 0,05 ccm Ser. 



-f Ochsenblut 



8. 0,5 ccm N -|- 0,5 ccm N S nach l / a Stunde filtriert -\- 0,05 ccm Ser. 



4- 0,6 ccm NS 4- Ochsenblut -f+4-f- 



Aus Versuch 3 ist ersichtlich, daß die zugesetzte Quantität der neutrali- 

 sierenden Substanz zur Neutralisation der hier benutzten Mischung von 

 Amboceptor und Komplement genügt. Wird nun die Komplementquantität 

 vermehrt, während die Amboceptormenge unverändert bleibt, tritt ungeachtet 

 desselben N-Zusatzes Hämolyse ein. Hieraus geht hervor, daß der Amboceptor 

 nicht neutralisiert ist. Die Möglichkeit aber, daß sich dessenungeachtet die 

 neutralisierende Substanz (N) mit dem Amboceptor verbindet , und in Ver- 

 such 4 aus dieser Bindung nur durch Massenwirkung des Komplements aus- 

 getrieben worden ist, wird durch Versuch 6 ausgeschlossen, wo ein vielfacher 

 Amboceptorzusatz keine Hämolyse bewirkt. 



Beim Vergleich der Versuche 5 und 6, in welchen die Mischung der 

 neutralisierenden Substanz und des Amboceptors vor dem Zusätze von 

 Komplement und Blut filtriert worden war , sehen wir ebenfalls , daß der 

 Amboceptor nicht neutralisiert worden ist , denn in Versuch 5 erhalten wir 

 durch den Zusatz von nur 0,05 ccm amboceptorhaltigen Serums eine sehr starke 

 Hämolyse, während in Versuch 6 mit der doppelten Amboceptorquantität, 

 aber mit der halben Komplementmenge , keine Hämolyse eintritt. Dasselbe 

 geht auch aus den Versuchen 7 und 8 hervor, wo N dem NS zugesetzt und 

 die Mischung vor dem Zusätze der anderen Faktoren filtriert worden war. 



Sämtliche diese Versuche weisen bestimmt darauf hin, daß 

 die neutralisierende Substanz auf das Komplement und nicht auf 

 den Amboceptor einwirkt. Dies wird durch folgendes Experiment 

 weiter erhärtet : 



N ergab nach Filtration ein wasserklares Filtrat = N filtr. 1 ccm 

 N filtr. 4" 0,05 ccm Ser. wurden gemischt und nach einer halben Stunde mit 

 Blutkörperchen von 2 ccm 5proz. Ochsenblut versetzt. Nach einer weiteren 

 halben Stunde wurde die Mischung zentrifugiert und die klare Lösung 

 abpipettiert. Die Frythrocyten wurden zweimal mit 0,8 proz. Kochsalzlösung 

 gewaschen, dann in 1 ccm Kochsalzlösung suspendiert und mit 0,3 ccm NS 

 versetzt = -| — | — j — (-. 



Zu der klaren abpipettierten Lösung setzte man 0,05 ccm Ser. -f~ 0,3 ccm 

 NS 4- Ochsenblut = 0. 



