Über die Verteilung des Stickstoffs im Eiweißmolekül. 305 



das Arginin. Es wird wie Arginin von Phosphorwolframsäure 

 noch in sehr starken Verdünnungen (über 1:6000) gefällt; auch 

 einem Überschüsse von Phosphorwolfrainsäure gegenüber verhält 

 es sich ähnlich. 



Ganz anders das Histiclin. Es ist wohl durch Phosphor- 

 wolframsäure gut fällbar, aber beim geringsten Überschüsse von 

 konzentrierter Säure geht der Niederschlag in Lösung. Wird nun 

 diese Lösung durch Zusatz von verdünnter Phosphorwolfram- 

 Salzsäure verdünnt, so fällt das Histidinphosphorwolframat wieder 

 aus, und dieser Niederschlag ist bei neuerlichem Zusätze von ver- 

 dünnter Säure viel weniger löslich als die entsprechenden Fällungen 

 des Arginins und Lysins. 



Aus diesem Verhalten ergibt sich für die Ausführung der Be- 

 stimmung die Regel, einen Überschuß von Phosphor wolframsäure 

 anzuwenden, aber nicht in zu hoher Konzentration, da sonst 

 Histidin in Lösung ginge. Beides wird erreicht, wenn man die 

 Verdünnung der Zersetzungsflüssigkeit so wählt, daß auf 1 Teil 

 Diaminostickstoff 1000 bis 1500 ccm Lösung kommen. Ist die 

 Histidin ausfällung unvollständig geblieben, so findet im Filtrate 

 bei Verdünnen oder bei Zusatz von verdünnter Phosphorwolfram- 

 säuremischung neuerliche Ausscheidung statt. 



Da die erste flockige Fällung viel löslicher ist als der kristallinische 

 Niederschlag, so ist mit Abfiltrieren und Waschen zu warten, bis der 

 Niederschlag kristallinisch geworden ist. Meist ist diese Umwandlung 

 nach 24, oft schon nach weniger Stunden vollendet, mitunter dauert es 

 auch länger. Es ist deshalb weniger Gewicht auf 24 stündiges Stehen- 

 lassen des Niederschlages zu legen, als darauf, daß derselbe beim Um- 

 rühren rein körnig, frei von jeder flockigen Beimengung erscheint. Ich 

 habe bei meinen Bestimmungen die Filtrate und Waschwässer wochen- 

 lang stehen lassen, ohne daß sich nachträglich auch nur eine Spur des 

 charakteristischen weißen Niederschlags gebildet hätte. Beim Auswaschen 

 muß man sich, um Verluste zu vermeiden, auf die Verwendung möglichst 

 geringer Mengen von Waschflüssigkeit beschränken. 



Bei Einhaltung dieser Bedingungen kann der Bestimmungs- 

 fehler auf 5 bis 10 Proz. des gesamten Diaminostickstoffs ver- 

 anschlagt werden, d. h. man findet z. B. statt 4 Proz. Diamino- 

 stickstoff nur 3,6 bis 3,8 Proz. Wie erwähnt, sind die Verluste 

 bei höherem Gehalt an Diaminosäuren kleiner. 



b) Nach Kutscher soll die Fällbarkeit von Monaminosäuren 

 durch Phosphorwolframsäure eine wichtige Fehlerquelle darstellen. 

 Daß Monaminosäuren in sehr konzentrierter Lösung namentlich 

 bei sehr hohem Säurezusatz [z. B. Zusatz von Kjeldahlsäure*)] mit 

 Phosphorwolframsäure ausfallen, ist bekannt, ebenso steht aber 



*) Vgl. Stolte, Diese Beiträge 5, 19. 

 Beitr. z. ehem. Physiologie. V. 20 



