148 Otto v. Fürth und Ernst Jerusalem, 



erst im Spätherbst begonnen haben, auf die beiden erstgenannten 

 Gattungen beschränken, die uns zu dieser Jahreszeit noch in 

 größeren Mengen zugänglich waren. (Der Halimasch kommt in 

 Wien im Spätherbst in großen Mengen auf den Markt; der künst- 

 lich gezüchtete, allerdings recht kostspielige Champignon ist 

 während des ganzen Winters erhältlich.) Das günstigste Objekt 

 für Tyrosinasegewinnung scheinen übrigens Russulaarten zu bilden,, 

 welche auch von den vorerwähnten französischen Forschern zu 

 diesem Zwecke in erster Linie verwendet worden sind. Zur Ge- 

 winnung der Tyrosinase gingen wir zumeist nach den Prinzipien 

 Bertrands 1 ) und seiner Mitarbeiter vor. Am zweckmäßigsten 

 erwies sich uns folgende Methode: 



Je 2 kg der Schwämme (Agaricus melleus) wurden fein zer- 

 hackt, mit Sand verrieben, hierauf mit 2 Liter Chloroform wasser 

 durchgerührt. Nach 2 bis 3 Stunden wurde die Flüssigkeit ab- 

 koliert, mit dem zweifachen Volumen Alkohol von 96 Proz. ver- 

 setzt, der sich nach einigem Umrühren sehr schnell absetzende 

 fädige Niederschlag sofort durch Rohseide abgesaugt und entweder 

 im Vakuum getrocknet oder aber sogleich mit 100 ccm Chloroform- 

 wasser verrieben. Die am nächsten Tage abnitrierte ferment- 

 haltige Flüssigkeit wurde in der Regel sogleich verwendet, da sie 

 sich als wenig haltbar erwies. 



Da die Tyrosinase von Alkohol sehr schnell geschädigt wird, kommt 

 es vor allem darauf an, die Berührung desselben mit den fermenthaltigen 

 Niederschlägen nach Möglichkeit abzukürzen. Der Champignon lieferte una 

 stets eine ziemlich schlechte Fermentausbeute; vermutlich, weil die Alkohol- 

 fälluugen in den Extrakten sich hier schlecht absetzten und die Filtration 

 daher viel längere Zeit in Anspruch nahm. Die Empfindlichkeit der Tyro- 

 sinase dem Alkohol gegenüber ist wohl auch die Ursache des Fehlschlagen» 

 aller Versuche, die Tyrosinase nach dem von Bach und Chodat*) für 

 Peroxydasen angegebenen Verfahren (Extraktion mit Alkohol 40 Proz. , Ein- 

 engen im Vakuum, Fällung mit absolutem Alkohol) zu isolieren. 



Während die frischen Pilzextrakte reich an Katalase (Wasser- 

 stoffsuperoxyd zersetzendem Permente) sind, erwiesen sich die durch 

 Chloroformwaaserextraktion aus den getrockneten Präparaten er- 

 haltenen byrosinasehaltdgen Lösungen als frei von Katalase. (Der 



Nachweis wunli- in einer mit mehrfach gebohrten (Jashülmen \cr- 



•ehenen and entsprechend adjustierten gasometriBchen Bürette ge- 



1 ) I'. e i- 1 ran <l , 1. c. 



I Bach and Chodat, l ntersuchungen über die Rolle der Peroxyde 

 in <ler Chemie der lebenden /eile: IV. Peroxydase. Ber. d. deutsch, ehem. 

 36, l 600. 



