Zur Kenntnis der melanotischen Pigmente usw. 149 



führt, welche das Gemenge von Fermentlösung, Wasserstoffsuper- 

 oxyd und Wasser aufnahm und die direkte Messung der entwickelten 

 Sauerstoffmenge gestattete.) 



3. Untersuchungsmethode. Wurde eine fermenthaltige 

 Flüssigkeit mit Tyrosinlösung (wir verwendeten meist eine solche, 

 welche 0,05 Proz. Tyrosin und 0,04 Proz. Natriumcarbonat ent- 

 hielt) und etwa überdies mit einer geringen Menge Wasserstoff- 

 superoxyd versetzt, so beobachtete man das Auftreten einer erst 

 rötlichgelben, dann bräunlichroten, schwarzbraunen, schließlich 

 schwarzen Färbung und nach einiger Zeit die Abscheidung 

 schwarzer Flocken unter Klärung der nahezu farblosen, über- 

 stehenden Flüssigkeit. 



Um nun diesen Vorgang einer Messung zugänglich zu machen, 

 erwiesen sich uns zwei Methoden als geeignet. 



a) Methode der Sedimentierung. Dabei erfolgte die 

 Schätzung der gebildeten Melaninmenge nach dem Volumen der 

 entstandenen Pigmentfällung. 



Die Serie der in bezug auf ihren Melaningehalt zu vergleichenden in 

 Bechergläsern befindlichen Flüssigkeiten wurde bis zu dem gewünschten 

 Zeitpunkte stehen gelassen. War bis dahin noch keine oder nur eine unvoll- 

 ständige Abscheidung des Pigmentniederschlages erfolgt, so wurde diese 

 durch Aufkochen unter Zusatz von etwas Calciumchlorid bewirkt, jede der 

 Flüssigkeiten mit den darin enthaltenen Pigmentflocken in ein Spitzglas 

 übertragen und das Absetzen der letzteren abgewartet. Nach Entfernung 

 der überstehenden klaren Flüssigkeit wurde jeder der Niederschläge in ein 

 nach unten zu stark verschmälertes graduiertes, etwa 12 ccm fassendes, in 

 Zehntelcubikcentimeter geteiltes Zentrifugiergläschen übertragen, sodann die 

 ganze Serie gleichzeitig zentrifugiert. Es stand uns zu diesem Zwecke eine 

 elektrisch betriebene Zentrifuge mit großer Umlaufsgeschwindigkeit zur Ver- 

 fügung, welche mit Hilfe von acht an der Peripherie einer Scheibe suspen- 

 dierten Metallhülsen das gleichzeitige Zentrifugieren von acht solchen gra- 

 duierten Gläschen gestattete. Bei der Übertragung der Pigmentfällungen 

 aus den Spitzgläsern in die Zentrifugiergläschen ließen sich Verluste leicht 

 vermeiden, indem nach kurzdauerndem Zentrifugieren die überstehende 

 Flüssigkeit beseitigt und durch Spülwasser aus den Spitzgläsern beliebig 

 oft ersetzt werden konnte. War die Gesamtmenge der Niederschläge in die 

 graduierten Gefäßchen übertragen, so wurde das Zentrifugieren in der Regel 

 einige Stunden lang und zwar so lange fortgesetzt, bis eine Abnahme der 

 schmalen Pigmentsäule im unteren Teile der Gläser praktisch nicht mehr 

 zu bemerken war. 



Kontrollproben, wobei von einer tintig geschwärzten Reaktionsflüssig- 

 keit aliquote Teile abgemessen und erst dann durch Kochen unter Chlor- 

 calciumzusatz „koaguliert" wurden, ergaben die praktische Brauchbarkeit 

 dieses Verfahrens, allerdings nur bei Gegenwart ausreichend großer Melanin- 

 mengen und innerhalb der Grenzen einer annähernden Schätzung. 



