150 Otto v. Fürth und Ernst Jerusalem, 



b) Methode der spektrophotometrischen Messung. 

 Ein unvergleichlich höheres Maß von Genauigkeit und überdies die 

 Möglichkeit, auch sehr geringe Melaninmengen in einer und der- 

 selben Probe zu verschiedenen Zeiten messend miteinander zu 

 vergleichen, bot uns die spektrophotometrische Methode 1 ). Wir 

 haben sie daher bei unseren späteren Versuchen ausschließlich benutzt. 



Die zu messende Flüssigkeit wurde in einem Troge mit planparallelen 

 Wänden und von 1 cm lichter Weite vor die untere Hälfte der Spalte eines 

 Glanschen Spektrophotometers älterer Konstruktion (von Schmidt u. 

 Hänsch in Berlin) gebracht. Als Spektralausschnitt (der selbstverständlich 

 innerhalb derselben Serie keine Änderung erfahren durfte) wurde meist der 

 Grenzbezirk zwischen Gelb und Grün, zuweilen auch Orange gewählt. Zur 

 Beleuchtung diente ein Auerbrenner. Die Berechnung der Extinktionskoeffi- 

 zienten erfolgte nach der Formel E = — 2 (log cotg <x -f- log tg ß) , wobei 

 « jene Winkelstellung des Nicols bedeutete, bei der Maximum der Hellig- 

 keit bestand, also keine verdunkelnde Flüssigkeit vorgeschaltet war, ß jene 

 Winkelstellung, auf die nach A r orlage des Troges mit der melaninhaltigen 

 Flüssigkeit vor die untere Spalthälfte eingestellt wurde. Die Nullstellung 

 wurde bei maximaler Verfinsterung des von der oberen Spalthälfte entwor- 

 fenen Spektrums durch Drehung des Nicols und bei vollständiger Abbien- 

 dung des anderen Spektrums bestimmt. Bezüglich zahlreicher Einzelheiten 

 der Messung sei hier auf die Originalbeschreibung des Apparates (Wiede- 

 manns Ann. der Physik 1, 351) sowie auf die ausführlichen Vorschriften in 

 Hupperts Analyse des Harnes (9. Aufl., S. 441) verwiesen. Die Prüfung 

 der Leistungsfähigkeit des Apparates an Oxyhämoglobinlösungen von be- 

 kanntem Gehalte ergab befriedigende Resultate. 



Da bekanntlich zwischen der Konzentration einer Farbstoff- 

 lösung und ihrem Extinktionskoeffizienten für einen bestimmten 

 Spektralbezirk Proportionalität besteht, gestaltete die Bestim- 

 mung von E einen Rückschluß auf die relative Menge ge- 

 bildeten Melanins. Auf die Bestimmung des Absorptionsverhält- 

 nisses, welche einen Rückschluß auf die absolute Melaninmenge 

 gestattet hätte, haben wir angesichts des Fehlens einer ausreichend 

 reinen konzentrierten Standardlösung von künstlichem Melanin ver- 

 zichtet. 



Die mitgeteilten Werte für a sind die Mittel aus einer größeren 

 Zahl, jeder Wert für ß das Mittel aus mindestens zwei ausreichend 

 übereinstimmenden Ablesungen. 



4. Einfluß der Temperatur auf die Tyrosinase- 

 wirkung. Um zunächst festzustellen, wo ungefähr das Temperatur- 



x ) Diese ist beim Studium der Melanine bereits von K. A. IL Monier 

 (1. c.) verwendet worden; allerdings nicht zur Mengen-, sondern zur Identi- 

 tstsbettimmung v<»n Pigmenten aus menschlichen Melanosarkomen und mela- 



notischen Harnen. 



