Zur Kenntnis der melanotischen Pigmente usw. 161 



gestellt worden waren) auch wenig wahrscheinlich, daß es sich um 

 eine zufällige Beimengung gehandelt habe. 



Es ergab sich nunmehr die Forderung, diese Beobachtungen 

 an möglichst heterogenem Fermentmaterial, und zwar solchem nicht 

 pflanzlichen, sondern tierischen Ursprunges nachzuprüfen, um 

 derart das Wesentliche vom Unwesentlichen der Erscheinungen 

 besser unterscheiden zu können. Über derartige Versuche mit 

 der Tyrosinase des Insektenblutes soll im folgenden berichtet 

 werden. 



B. Tierische Tyrosinase. 



1. Darstellung tierischer Tyrosinase. Die Darstellung 

 tierischer Tyrosinase erfolgte, von Lepidopterenhämolymphe aus- 

 gehend, nach dem seinerzeit von dem einen uns gemeinsam mit 

 Schneider 1 ) beschriebenen Verfahren. Als Ausgangsmaterial 

 dienten meist die Puppen des Wolf milchsch wärmers (Deliphila 

 Euphorbiae), gelegentlich auch solche der Arten Platysamia Cecropia 

 und Atacus Cynthia. Das Verfahren beruht darauf, daß die Hämo- 

 lymphe durch Halbsättigung mit Ammonsulfat gefällt und der ge- 

 waschene und abgepreßte Niederschlag in Sodalösung von 0,04 Proz. 

 gelöst wird. Die so erhaltene Lösung erweist sich stark tyrosinasehaltig. 



2. Einfluß von Wasserstoffsuperoxyd, Alkaleszenz und 

 Katalysatoren. Um zunächst den Einfluß des Wasserstoff- 

 superoxyds auf tierische Tyrosinase festzustellen, wurde folgende 

 Serie aufgestellt: Proben, je 1 ccm Fermentlösung und 1 ccm 

 Tyrosinlösung enthaltend, ferner: a) ccm H 2 2 + 0,9 ccm H 2 0; 

 b) 0,3 ccm H 2 2 -|- 0,6 ccm H 2 O ; c) 0,6 ccm H 2 2 -\- 0,3 ccm H 2 O ; 

 d) 0,9 ccm H 2 2 -|- Occm H 2 0. Während der ersten Stunden waren 

 die wasserstoffsuperoxydhaltigen Proben den H 2 2 - freien gegen- 

 über in der Melaninbildung stark voraus; später glich sich aber 

 dieser Vorsprung aus und bei der spektrophotometrischen Unter- 

 suchung am folgenden Tage fielen die Unterschiede bei allen vier 

 Proben in die Fehlergrenzen: a) ß 5,8°, E 2,272; b) ß 6,2°, E 2,216; 

 c)/3 6,l°, E 2,228; d)/5 6,6°, JE? 2,160. Es war also nur die Schnellig- 

 keit der Melaninbildung, nicht aber der Endzustand durch 

 die Gegenwart des Wasserstoffsuperoxyds beeinflußt worden. 



Um den Einfluß der Alkaleszenz zu prüfen, wurde folgende 

 Serie aufgestellt: Proben, je 1 ccm Tyrosin und 1 ccm Ferment- 

 lösung enthaltend, ferner wechselnde Mengen (0,2 bis 1 ccm) 

 Normalsäure bzw. Alkali mit soviel Wasser, daß die Gesamtmenge 



l ) 0. v. Fürth und Schneider, 1. c, S. 234. 



Beitr. z. ehem. Physiologie. X. 11 



