Zur Kenntnis der Wirkung des proteolytischen Fermentes usw. 289 



Es kam dabei das von E. Zunz 1 ) in Anwendung gebrachte 

 und für seiue Zwecke modifizierte Verfahren von Bau mann und 

 Böhmer in Anwendung, welches in der fraktionierten und. quan- 

 titativen Abscheidung der Albumosen durch Zinksulfat besteht. 

 Die Kulturflüssigkeit enthält außer Salzen noch Albumosen und 

 deren Derivate, während die Menge von Albumin ganz gering zu 

 veranschlagen ist. Ich hielt mich also genau an die von Zunz 

 angegebenen Vorschriften, nur verzichtete ich auf die Trennung 

 der einzelnen Deuteroalbumosen. 



Die alkalische Reaktion von 10 ccm Bakteriennitrat wurde mit Schwefel- 

 säure neutralisiert, dann mit 0,2 ccm einer bestimmten Schwefelsäure ver- 

 setzt (1 Volum konzentrierte Schwefelsäure auf 4 Volumen Wasser) und 

 hierauf mit Zinksulfat auf Halbsättigung gebracht. Es fällt sofort ein weiß- 

 licher, flockiger Niederschlag aus, der die „primären Albumosen" enthält, 

 eventuell das noch in der Kulturflüssigkeit vorhandene Eiweiß. Ich stellte 

 die mit Zinksulfat halbgesättigte Lösung anfangs für ein paar Stunden in 

 den Brutschrank , dann ließ ich aber in den späteren Versuchen 24 Stunden 

 bei Zimmertemperatur stehen , da sich der weißliche Niederschlag dann gut 

 absetzte und leicht filtrieren ließ. Der Niederschlag wurde mit halb- 

 gesättigter, etwas angesäuerter Zinksulf atlösung gewaschen, die vereinigten 

 Filtrate und Waschwässer mit Zinksulfat in Substanz ausgesalzen. (Es 

 empfiehlt sich, diese Lösungen in den Brutschrank zu stellen und erst nach 

 einigen Stunden herauszunehmen; in der Kälte fällt dann das überschüssige 

 Zinksulfat aus.) Nach 24 Stunden haben sich die „Deuteroalbumosen" als eine 

 mehr oder minder braungelbe Masse abgeschieden, welche eigentümlich zähe 

 ist und hartnäckig am Glasstab und an den Wänden des Gefäßes haftet, so 

 daß sie, einmal angetrocknet, manchmal nur durch Auflösen in Wasser und 

 neuerliches Aussalzen quantitativ entfernt und auf das Filter gebracht 

 werden kann. Die Niederschläge werden mit gesättigter Zinksulfatlösung 

 gewaschen und samt den Filtern der N-Bestimmung nach Kjeldahl unter- 

 zogen. Das Filtrat der Ganzsättigung bleibt auf weiteren Zinksulfatzusatz 

 klar, gibt Biuretreaktion und enthält somit die echten Peptone, Peptoide 

 und auch noch weiter abgebaute Teile des Eiweißmoleküls, welche keine 

 Biuretreaktion mehr geben. Das Filtrat der Ganzsättigung wird nach neuer- 

 lichem Ansäuern durch Schwefelsäure mit Phosphorwolframsäure versetzt, 

 nach ein bis zwei Tagen wird von dem Niederschlag abfiltriert und das 

 Filtrat mit Phosphorwolframsäure auf noch etwa vorhandene fällbare Sub- 

 stanz geprüft; die mit Phosphorwolframsäure erhaltenen Niederschläge 

 werden mit angesäuertem Wasser gewaschen, und zwar wurde bei den ein- 

 zelnen Bestimmungen meist eine annähernd gleich große Menge Wasch- 

 wasser in Anwendung gebracht. Niederschlag und Filtrat wurden dann auf 

 ihren Stickstoffgehalt untersucht. Mit diesem Verfahren erhält man zwei 

 N-Werte, welche nach Hausmann' 2 ) als Monaminostickstoff (im Filtrat), als 

 Diaminostickstoff (im Niederschlag) bezeichnet werden können. Obwohl die 



l ) Zunz, Zeitschr. f. physiolog. Chem. 27. 

 s ) Hausmann, ebenda 27 und 29. 



Beitr. z. chem. Physiologie. X. in 



