Zur Kenntnis der tryptischen Eiweifsspaltung. 47 



Flüssigkeit mit dem gleichen Volumen 96prozentigen Alkohols ver- 

 setzt. Der so erhaltene Niederschlag wurde abfiltriert und, weil zu 

 viel Verunreinigungen enthaltend, entfernt, das Filtrat nochmals mit 

 dem gleichen Volumen Alkohol gefällt. Der jetzt erhaltene Nieder- 

 schlag erwies sich als brauchbar. Er wurde abfiltriert, abgeprefst, in 

 Wasser gelöst, 3 Stunden lang gegen fliefsendes Wasser dialysiert, 

 dann neuerdings unter Toluol durch 30 Tage bei 40° der Selbst- 

 verdauung überlassen. Die Lösung enthielt dann nur Spuren von 

 koagulablem Eiweifs — wie jede bisher noch so rein hergestellte 

 Trypsinlösung — und löste Fibrin rasch und vollständig. 



Die Anordnung der mitzuteilenden Versuche gestaltete sich 

 wie folgt : 2 g völlig trockenes Albumin wurden in einer Koch . 

 flasche mit 40 ccm der Pankreaslösung übergössen, dann mit 0,2 ccm 

 einer fünfprozentigen Natriumkarbonatlösung, 160 ccm Wasser und 

 10 ccm Toluol versetzt, die gut umgeschüttelte Mischung bei 40° 

 zur Verdauung hingestellt. Nach füuf Tagen war der aus Eiweifs 

 bestehende Bodensatz bis auf einen kleinen Rest gelöst. Da dieser 

 in den nächsten Tagen nur noch sehr langsam abnahm, wurde die 

 Verdauung am 10. Tage unterbrochen, das Toluol durch vorsichtiges 

 Abheben und Verdunstenlassen entfernt und die auf 200 ccm ge- 

 brachte Flüssigkeit durch ein trockenes Filter filtriert. 



Eine Kjeldahl-Bestimmung in dem abfiltrierten und ausge- 

 waschenen Eiweifs ergab die Menge des von Trypsin nicht ange- 

 griffenen Stickstoffs. 



Vom Filtrate wurden zunächst aliquote Teile (zwei Proben zu 

 20 ccm) entnommen und darin 



1. der durch Destillation mit Magnesia austreibbare, 



2. der im Rückstand enthaltene durch Phosphorwolframsäure 

 fällbare, 



3. der dann im Phosphorwolframsäurefiltrat verbleibende Stick- 

 stoff bestimmt. 



In den Einzelheiten des Verfahrens folgte ich der Vorschrift 

 Hausmanns 1 ). Wie man sieht, entsprechen die untersuchten 

 Stickstofffraktionen dem Amid-, Monamino- und Diaminostickstoff 

 Hausmanns. 



Der unverbrauchte Teil der Verdauuugsflüssigkeit wurde in 

 zwei Portionen neuerdings mit Toluol versetzt und der Verdauung 

 bei 40° überlassen. Bei der einen Portion wurde die Digestion nach 



x ) Gegen die von Hausmann zur Bestimmung des Diamino- Stickstoffs 

 angewandte Methodik sind von Kutscher Bedenken erhohen worden. Da 

 dieselben anderenorts ihre Besprechung finden werden, ist für mich keine 

 Nötigung gegeben, darauf einzugehen. 



