234 Priv.-Doz. Dr. Otto v. Fürth und Hugo Schneider, 



Zur Feststellung des Einflusses der Temperatur wurden eine 

 Reihe von Proben mit je 10 com jTyrosinlösung von 0,05 Proz., 

 1 / 2 ccm Sodalösung von 1 Proz. und mit je 1 com frischer ver- 

 dünnter Hämolymphe angesetzt. Es ergab sich, dafs bereits eine 

 Temperatur von 30° genügt, um den Verfärbungsvorgang zu 

 verhindern. Ein merklich verzögernder Einflufs der Eisschrank- 

 temperatur gegenüber der Zimmertemperatur wurde nicht bemerkt. 

 Wurden die einige Zeit bei 30° oder einer höheren Temperatur 

 gehaltenen Proben abgekühlt, so blieb auch hinterher die Ver- 

 färbung gänzlich aus. 



Das verdünnte Blut giebt, mit etwas Guajaktinktur geschüttelt, 

 erst bei längerem Stehen eine schmutzige, dunkelblaugrüne Fär- 

 bung. Dagegen fällt die Spitz er sehe Reaktion deutlich positiv 

 aus : wird etwas wässerige, alkalihaltige Paraphenylendiaminlösung 

 mit zwei Tropfen alkoholischer oc-Naphtollösung und einem Tropfen 

 frischen Insektenblutes geschüttelt, so erfolgt die Bildung eines 

 violettroten, mit Chloroform leicht extrahierbaren Farbstoffes. 



Die mitgeteilten Beobachtungen führten zu der Annahme, dafs 

 das Lepidopterenblut ein Enzym enthält, das befähigt ist, Tyrosin, 

 ebenso wie auch ein im Blute selbst vorkommendes Chro- 

 mogen, bei Gegenwart von Sauerstoff zu dunkel gefärbten Pro- 

 dukten umzuwandeln. 



3. Eigenschaften der Lepidopteren-Tyrosinase. 



Die Bemühungen , die Tyrosinase aus der Hämolymphe 

 durch Alkoholfällung sowie nach dem Verfahren Jacobys*) 

 durch Fällung mit Uranylacetat aus alkalischer Lösung zu isolieren, 

 blieben erfolglos. Dagegen gelang die Abtrennung des Enzyms 

 vom Chromogen und von den krystalloiden Substanzen des Blutes 

 mit Hülfe der fraktionierten Salzfällung. 



Die Hämolymphe einer Anzahl von Deiliphila-Puppen wurde in 

 einer abgemessenen Menge halbgesättigter, neutraler Ammonsulfat- 

 lösung aufgefangen und mit so viel einer gesättigten Ammonsulfatlösung 

 versetzt, da£s die Flüssigkeit nachher wieder halb gesättigt erschien. 

 Der entstandene Niederschlag wurde sogleich abfiltriert, mit halb- 

 gesättigter Ammonsulfatlösung gewaschen, zwischen Filtrierpapier scharf 

 abgeprefst und schliefslich in Natriumkarbonatlösung von 0,05 Proz. 

 gelöst. In der so gewonnenen eiweilshaltigen Lösung fanden sich 

 relativ reichliche Mengen von Tyrosinase. 



*) Martin Jacoby, Über das Aldehyde oxydierende Ferment der 

 Leber und Nebenniere (aus dem physiol.-chem. Institut zu Strafsburg), Zeitschr. 

 f. physiol. Chem. (1900) 30, 134. 



