Über die Einwirkung von Chloroform auf Hämoglobin. 69 



Durch diese Erwägungen veranlafst, führte ich eine Reihe 



spektroskopischer Untersuchungen des Chloroformniederschlages aus. 



Als Ausgangsmaterial diente mir zweimal umkrystallisiertes, 



auf der Centrifuge mehrfach ausgewaschenes Pferde- und IJunde- 

 hämoglobin, das in derselben Weise dargestellt war, wie in meinen 

 früheren Arbeiten angegeben, jedoch ohne Zuhülfenahme von 

 Ammoniak *). 



Der Chloroformniederschlag ist, wie schon erwähnt, unlöslich 

 in reinem Wasser; ebenso wenig löst er sich in Neutral Salzlösungen, 

 dagegen leicht in schwach alkalischen Lösungen und in sehr ver- 

 dünnten Säurelösungen. Beim Neutralisieren fällt er wieder aus. 



Es wurden die Spektra sowohl der alkalischen, als auch der 

 saiiren Lösungen untersucht. 



Bei den vorläufigen Untersuchungen stellte sich heraus, dafs 

 nicht zu konzentrierte alkalische Lösungen des Chloroformnieder- 

 schlages, die etwa 0,2 Proz. Soda enthielten, im Spektrum zwei 

 schwache Bänder zeigten, die ihrer Lage nach den Absorption s- 

 streifen des Oxyhämoglobins entsprachen. Das spektroskopische 

 Bild war aber nicht identisch mit dem des Oxyhämoglobins. 



Letzteres charakterisiert sich bekanntlich dadurch, dafs der 

 der Linie D anliegende Streifen cc schärfer begrenzt und dunkler 

 erscheint als der Streifen ß. Bei weiterer Verdünnung der Blut- 

 farbstofflösung schwindet zunächst der Streifen ß, während das 

 Band cc noch deutlich sichtbar ist. 



Die alkalische Lösuno- des Chloroformniederschlaoes dao-effen 

 giebt ein Spektrum, in dem scheinbar der zweite Streifen (/3) eine 

 gröfsere Intensität besitzt als der erste Streifen («). Verdünnt 

 man die Lösung, so schwinden beide Bänder gleichzeitig, vielleicht 

 sogar Band a etwas früher als Band ß. 



Hat man konzentriertere Lösungen vor sich, so kann man noch 

 einen Schatten wahrnehmen, der vom Band a aus über die D-Linie 

 hinaus zum Rot hingeht. In sehr konzentrierten Lösungen, die 

 nur noch rotes Licht durchlassen , sah ich zuweilen einen ver- 

 waschenen Streifen zwischen den Linien C und D, näher an C. 



Auf Zusatz einer gröfseren Menge reduzierender Mittel 

 (Stockes' Reagens oder Schwefelammonium) zu einer mäfsig 

 konzentrierten Lösung des Chloroformniederschlages erscheint so- 

 fort das spektrale Bild, das Formanek **) beschreibt, d.h. an 



*) Zeitschr. f. Biologie 24, 47 und 31S. 

 :: *) 1. c, S. 418. 



