Über die Volhardsche Methode usw. 123 



Diese basiert, wie wir sahen, auf der Erfahrung, daß reines, un- 

 verändertes Kasein in Verdauungssalzsäure gelöst, durch Natrium- 

 sulfat vollständig gefällt wird. Setzt man also unter sonst gleichen 

 Bedingungen einer bestimmten, gleichen Menge Kaseinlösung 

 verschiedene Fermentmengen zu und läßt sie gleich lange im 

 Wasserbad von 40° auf die Eiweißlösung einwirken, so wird der 

 durch Zusatz von Natriumsulfat ausgefällte Rückstand um so ge- 

 ringer sein, je weniger Kasein unverdaut geblieben, d. h. je mehr 

 durch die Fermentwirkung peptonisiert worden ist: Je größer der 

 Rückstand, desto geringer die Fermentmenge unter sonst gleichen 

 Versuchsbedingungen. Auf Grund dieser Erwägung sammeln 

 Thomas und Weber den Niederschlag auf gewogenem Falten- 

 filter, waschen ihn mit destilliertem Wasser aus, trocknen und 

 wägen ihn. Die Gewichtsdifferenz der Rückstände aus einem 

 pepsinhaltigen und einem pepsinfreien Versuch dient also hier als 

 Maß für die peptische Wirkung. 



Die Umständlichkeit dieser Gewichtsbestimmung vermeidet 

 Volhard durch Titration der Filtrate. Er ging von der Annahme 

 aus, daß bei fortschreitender Peptonisierung der Kaseinlösung die 

 Acidität des Filtrates zunehmen müsse, indem die durch das 

 Natriumsulfat nicht mehr fällbaren salzsauren Peptone das Filter 

 passieren. Seine Versuche ergaben, daß bei Anwendung der 

 gleichen Mengen derselben sauren Kaseinlösung ohne Pepsinzusatz 

 die Acidität des Filtrates stets konstant und viel kleiner war, als 

 dem wahren Säuregehalt der Stammlösung entsprach. Daraus geht 

 hervor, daß unter gleichen Versuchsbedingungen im Kaseinnieder- 

 schlag stets die gleiche Menge Salzsäure eingeschlossen bleibt, 

 und nur die freie Salzsäure ins Filtrat übergeht. Man ist somit 

 berechtigt, einen über die als konstant festgestellte Acidität der 

 betreffenden Stammlösung hinausgehenden Säurewert auf die ins 

 Filtrat übergegangenen salzsauren Peptone zu beziehen, und aus 

 dem Aciditätszuwachs auf den Verdauungsgrad zu schließen. 



Dementsprechend verhalten sich, wie Volhard in der oben 

 zitierten Arbeit erwähnt, die Rückstände umgekehrt proportional 

 der Acidität der Filtrate ; und Volhard fand, daß sich die Aciditäts- 

 zunahmen der Filtrate proportional den Quadratwurzeln aus dem 

 Produkt von Fermentmenge mal Verdauungszeit verhielten, also 

 dieselbe Regel, die Schütz und Huppert für die sekundären 

 Albumosen bei der Pepsinverdauung gefunden hatten. 



Herr Dr. Volhard hat mir gestattet, einige seiner früheren, 

 noch nicht veröffentlichten Versuche an dieser Stelle mitzuteilen. 



Als Stammkaseinlösung diente die von Thomas und Weber be- 

 schriebene salzsaure Lösung von 50 g Kasein in 1000 ccm verdünnter 

 Salzsäure, enthaltend 70 ccm normal-HCl. 



