Tiber die Volhardsche Methode usw. 127 



Dies letztere ist bei Anwendung der Volhardschen Methode, wie 

 ich mich überzeugen konnte, nicht ratsam; einmal ist, um in der ange- 

 führten Weise eine Nutroselösung zu erhalten, der Zusatz einer nicht ganz 

 unerheblichen Menge n-NaOH nötig, andererseits ist die Herstellung 

 der Kaseinlösung aus Kasein -f-NaOH weniger zeitraubend als die aus 

 Nutrose, besonders wenn man das vorzüglich reine Kaseinpräparat der 

 Fabrik Rhenania-Aachen verwendet. 



Soll die Natriumkaseinlösung der Pepsinbestimmung dienen, so werden 

 zu der einzelnen Probe von 100 ccm Stammlösung 11 ccm n-HCl zugesetzt. 



Man bringt am besten die Säure zuerst in das Verdauungsgefäß, ver- 

 dünnt mit etwa 150 bis 180 Wasser und läßt dann die Kaseinlösung 

 einlaufen. Anderenfalls muß man die Kaseinlösung mit Wasser verdünnen 

 und auf -40° erwärmen, dann erhält man auch bei nachträglichem Zusatz 

 der 11 ccm HCl schnell eine klare Lösung. 



Als Digestionsgefäß verwendet Volhard langhalsige Flaschen, welche 

 mit 2 Marken von 300 und 400 ccm versehen sind.*) Im einzelnen gestaltet 

 sich demnach ein Versuch folgendermaßen: 



Man mißt aus einer Bürette genau 11 ccm n-HCl in die Pepsin- 

 flasche, füllt mit aq. dest. auf etwa 150 ccm auf und gibt dann unter 

 Schütteln 100 ecm der beschriebenen Na-Kaseinlösung aus einer durch 

 |— Rohr mit der Vorratsflasche verbundenen, umgekehrt eingespannten 

 100 ccm Pipette zu, wobei keine Kaseinausscheidung bleiben darf. Dann wird 

 eine beliebige, aber genau zu bestimmende Menge des zu untersuchenden 

 Magensaftes mit einer Pipette zugefügt, am besten nachdem die Mischung 

 vorher schon im Wasserbad von 40° erwärmt wurde, und mit aq. dest. 

 bis zu Marke 300 aufgefüllt. Nun wird die Mischung beliebige aber genau 

 zu bestimmende Zeit hindurch — z. B. 1 Stunde lang — der Digestion 

 im Wasserbad von 40° ausgesetzt. Um die Verdauung zu unterbrechen, 

 genügt der Zusatz von 100 ccm 20proz. Na 2 S0 4 -Lösung bis zur Marke 400, 

 welche, wie oben bereits besprochen, die Pepsinwirkung sofort unterbricht 

 und das bis dahin unverändert gebliebene Kasein in Flocken ausfällt, 

 während die unter der Pepsinwirkung entstandenen salzsauren Peptone 

 bei der nun folgenden Filtration ins Filtrat mit übergehen. 



Alsdann wird die Acidität von 100 oder 200 ccm des Filtrates durch 

 Titration mit y^-NaOH bestimmt. Von der Gesamtacidität des Filtrates 



wird die ein für alle Mal bestimmte, auf ihre Konstanz von Zeit zu Zeit 

 zu prüfende Acidität der Stammlösung subtrahiert, um den auf die 

 Bildung salzsaurer Peptone zurückzuführenden Säurezuwachs des Filtrates 

 zu finden. Davon ist natürlich der Säurewert des zugesetzten Magen- 

 saftes noch abzuziehen. 



Als Indikatoren für die Aciditätsbestimmung wurden Nitrophenol, 

 Alizarin und Phenolphthalein angewandt. Es ergab sich, daß mit Phenol- 

 phthalein die schärfsten Umschläge erzielt werden. Auf einzelnes wird bei 

 einer der folgenden Tabellen aufmerksam zu machen sein. 



Die Resultate der mit der Volhardschen Methode ausge- 

 führten Pepsinbestim mungen bestätigen, daf3 das Verfahren bei 

 nicht zu hochgradiger Fermentwirkung — wie sie durch zu groß 



*) Geliefert von Wallach Nachf. in Kassel. 



