Beiträge zur Kenntnis der Autolyse. 179 



15 ccm Chloroform 11 ) und 25 ccm Toluol in einer gut verschließbaren 

 Flasche*) stark durchgeschüttelt und bis zum nächsten Tage im Zimmer 

 stehen gelassen. Dann wurde die steril befundene Masse 3 Monate lang 

 bei 37° der Autolyse überlassen. Nachdem am Ende der Digestion die 

 Sterilität festgestellt war, wurde die Flüssigkeit aufgekocht, filtriert und 

 der Filterrückstand mit heißem Wasser ausgewaschen**). Die enteiweißte 

 Flüssigkeit wurde auf 2340 ccm aufgefüllt und mit 25 ccm Chloroform 

 versetzt. (4 ccm Flüssigkeit = 1 g Milz ) 100 ccm enthielten 0,6048 g 

 Stickstoff. Zur Aufarbeitung gelangten 2300 ccm (= 13,9 g N). 



b) Lienal-myelogene Leukämie. Mann, Tod am 20. XII. 03. Sektion 

 12 Stunden nach dem Tode. Ein größeres Stück Milz wurde wie oben 

 verarbeitet. 918 g Milzbrei wurden mit der doppelten Gewichtsmenge 

 Wasser, 40 ccm Chloroform und 60 ccm Toluol gemischt und bis zum 

 nächsten Tage im Zimmer stehen gelassen. Dann wurde die steril be- 

 fundene Masse 3 Monate lang bei 37° der Autolyse überlassen. Nachdem 

 die Sterilität festgestellt war, wurde die Masse wie oben enteiweißt, die 

 enteiweißte Flüssigkeit auf 3640 ccm aufgefüllt und mit 32 ccm Chloroform 

 versetzt. In 100 ccm Flüssigkeit = 0,5768 g N. 3560 ccm der Flüssig- 

 keit (= 20,5 g N) wurden nun mit den von der ersten Milz herrührenden 

 2300 ccm Flüssigkeit (= 13,9 g N) gemischt, 100 ccm für andere Versuche 

 abgenommen, der Rest auf etwa 5 Liter eingedampft und heiß filtriert. 

 Das Filtrat gab die Tryptophanreaktion. Beim Sättigen mit Ammoniumsulfat 

 entstand eine ziemlich erhebliche Ausscheidung. 



Analysen. 



1. Je 5 ccm erforderten zur Bindung des nach Kjeldahl entwickelten 

 Ammoniaks a ) 2 4 ccm ^-H 2 S0 4 



10 =0,0336 g N. 



b) 24 ccm *-H,S0 4 & 



/ 10 Z 4 



2. 50 ccm erforderten zur Bindung des im Vakuum bei 37 bis 41 ° 

 durch Magnesia ausgetriebenen Ammoniaks 12 ) 13,29 ccm ü-H 2 S0 4 = 0,0186 g 

 Ammoniakstickstoff. 



3. 20 ccm mit 45 ccm Phosphorwolframsäure-Salzsäuremischung ge- 

 fällt; der Niederschlag abfiltriert, mit oproz. Schwefelsäure durch einmaliges 

 Anreiben, dann auf dem Filter ausgewaschen, Filtrat auf 187 g aufgefüllt. 

 Der Niederschlag erforderte zur Bindung des nach Kjeldahl entwickelten 



*) Ich benutzte bei allen Versuchen Glasgefäße mit gut eingeschliffenen 

 Glasstopfen, die außerdem mit Pergamentpapier Überbunden werden. Alles 

 Untersuchungsmaterial, besonders auch alle schon zur Analyse vorbereiteten 

 Lösungen wurden ausnahmslos durch reichlich bemessenen Zusatz von Chloro- 

 form bezw. Chloroform und Toluol sicher gegen Zersetzung durch Bakterien 

 geschützt, auch wo dies nicht besonders erwähnt ist. 



**) Das Auswaschen solcher Rückstände führe ich stets in der Weise 

 aus, daß ich die Masse möglichst vollständig vom Filter nehme, im Mörser 

 mit heißem Wasser anrühre und von neuem auf das Filter bringe. Wird 

 das Filter beim Abnehmen des Niederschlags beschädigt, dann wird es 

 ebenfalls mit ausgelaugt. Bei reichlichen Filterrückständen wird dies Ver- 

 fahren noch ein oder zweimal wiederholt und dann das Auswaschen auf dem 

 Filter zu Ende geführt. — In der gewöhnlichen Weise, durch einfaches Auf- 

 gießen von Wasser auf den Niederschlag im Filter, lassen sich derartige 

 Niederschläge nur schwierig genügend auswaschen. 



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