Die Gesetze der Hippursäuresynthese. 267 



karbonatlösung. Nachdem die (alkalisch reagierenden) Destillate in 

 Schalen bis fast zur Trockene eingedampft waren, wurde abermals in 

 Extraktionsflaschen gespült und in derselben Weise wie früher 3 mal mit 

 Petroläther ausgezogen, die Extrakte in gewogene Kölbchen filtriert, der 

 Petroläther durch einen (durch Schwefelsäure) getrockneten Luftstrom bei 

 Zimmertemperatur entfernt und die zurückbleibende tadellos weiße Benzoe- 

 säure gewogen. Bei der Leichtflüchtigkeit der Benzoesäure ist es nur er- 

 wünscht, daß während des Blasens die Temperatur des Petroläthers bis 

 unter 0° sinkt, sodaß sich die Wände der Kolben mit einer Eiskruste be- 

 decken. Da der Petroläther so gut wie kein Wasser beim Ausschütteln 

 aufnimmt, pflegte die zurückbleibende Benzoesäure, sobald der Geruch nach 

 Petroläther verschwunden war, schon gewichtskonstant zu sein, andern- 

 falls leitete ich noch 10 bis 15 Minuten getrocknete Luft durch die Kolben 

 oder stellte sie für einige Stunden in den Schwefelsäureexikkator. Die an 

 der Wage abgelesenen Werte wurden schließlich unter Vernachlässigung 

 des Volumens der alkoholunlöslichen Harnbestandteile auf die Gesamt- 

 harnmenge umgerechnet und von dem Resultat die Normalausscheidung 

 des betreffenden Tieres in Abzug gebracht. 



Nachdem mittels dieser etwas umständlichen Methode die wichtigsten 

 der oben mitgeteilten Tatsachen ermittelt waren, habe ich in späteren 

 Versuchen das Verfahren gelegentlich dadurch abgekürzt, daß ich die 

 Dampfstromdestillation umgangen habe. Hierbei macht man keinen Fehler, 

 da durch die Analyse der abzuziehenden Normalausscheidung die Ver- 

 unreinigungen der abgeschiedenen Säuren bestimmt werden. Bei diesem 

 Vorgehen muß man aber die verseiften Proben I und III zunächst nach 

 Ansäuren mit Schwefelsäure und Wiederalkalischmachen mit Karbonat 

 mit Alkohol von den vielen Salzen befreien. Diese Extraktion geht rasch 

 von statten, wenn man das Auswaschen der Salze auf dem Saugfilter 

 vornimmt.*) 



Als Beleg für die Brauchbarkeit der Methode sei nachstehendes an- 

 geführt: 



Je 50 ccm eines frischen sauren Gemisches von Kaninchenharnen 

 gaben in Parallelbestimmungen: 



freie Benzoesäure ' m gebundene Benzoesäure JJ' . 



je 30 ccm eines Harngemisches a) ohne Zusatz, b) nach Zusatz von 

 0,201 freier und 0,146 als Hippursäure gebundener Benzoesäure gaben: 

 a) 0,012 freie Benzoesäure b) 0,215 freie Benzoesäure 



0,013 gebundene Benzoesäure 0,150 gebundene Benzoesäure 

 nach Abzug der präexistenten Säuremengen: 



freie Benzoesäure: ^gesetzt 0,201 

 gefunden 0,203 



gebundene Benzoesäure: zu f s< f zt <\ 1 ^ 



gefunden 0,137 



Hiernach liegen die Fehler der Methode, bei Bestimmung von Mengen, 



wie sie in meinen Versuchen in Betracht kamen, in den Milligrammen, 



was das Ergebnis zahlreicher im Verlaufe der Versuche vorgenommener 



Parallelbestimmungen bestätigt hat. Wegen der notwendigen Umrechnung 



der Resultate auf das Gesamtharnvolumen vergrößert sich der Fehler des 



*) In den oben mitgeteilten Tabellen sind nur die mit dem Vermerk 

 „nicht destilliert" so ausgeführt. 



