476 Ryokichi Inada, 



Heu wurde mit Wasser übergössen und damit 24 Stunden 

 stehen gelassen. (Dann ist die Reaktion im Heuinfus am stärksten, 

 Läßt man 3 bis 4 Tage stehen, so verschwindet die Reaktion wieder.) 

 Das Infus wurde mit Phosphorsäure destilliert, wobei die frag- 

 liche Substanz im Beginn der Destillation überging, das Destillat 

 mit Kalkwasser alkalisch gemacht, eingedampft und der Rückstand 

 mit Alkohol ausgezogen. Das Alkoholextrakt gab nach Verjagen 

 des Alkohols die Reaktion in der oben für Kaninchenharn ange- 

 gebenen Art in sehr ausgesprochener Weise, enthielt aber nur 

 sehr wenig organische Substanz. Trocken erhitzt verpuffte der 

 Rückstand; die wässerige Lösung färbte angesäuert Jodstärke- 

 kleister tief blau, gab Rotfärbung mit Brucin und die typischen 

 Reaktionen der Nitrite mit p-Phenylendiamin , Diphenylamin und 

 Sulfanilsäure. 



Die beobachtete Indolreaktion beruht sonach auf Bildung von 

 Nitrosoindol, und es gelingt leicht durch ausgiebige Verdünnung 

 einer Nitritlösung einen Punkt zu erreichen, wo auch der oben 

 beobachtete Übergang in Grün zustande kommt. 



Die Indolreaktion auf Nitrite ist überaus empfindlich. Versetzt man 

 2 ccm Natriumnitriilösung mit 4 Tropfen lproz. Indollüsung und 2 Tropfen 

 konzentrierter Schwefelsäure, so erhält man noch bei einem Gehalt von 

 1 : 4000000 Rotfärbung. Daraus ergibt sich die Notwendigkeit bei Unter- 

 suchung auf Glyoxylsäure völlig nitritfreie Reagenzien zu verwenden. 

 Konzentrierte Schwefelsäure und destilliertes Wasser enthalten nicht selten 

 Spuren von salpetriger Säure. In käuflichem Natriumhydroxyd und Natrium- 

 karbonat scheinen Nitrite regelmäßig vorzukommen. 



Vermutlich entsteht das im Heuinfus gefundene Nitrit der 

 Hauptmenge nach durch bakterielle Reduktion aus den vorhandenen 

 Nitraten und verschwindet dann begreiflicherweise bei Weitergehen 

 der Reduktion. Genau so verhält es sich mit dem nitrithaltigen 

 Harn. 



Nach dem Gesagten ist es nicht schwer, sich bei der Unter- 

 suchung auf Glyoxylsäure vor Verwechslung mit der Nitrosoindol- 

 reaktion zu schützen. Es empfiehlt sich zunächst eine Probe mit 

 Indol und verdünnter Schwefelsäure am Harn selbst, dann je drei 

 Proben und zwar: 1. mit konzentrierter Schwefelsäure allein, 

 2. mit Indol und konzentrierter Schwefelsäure, 3. mit Skatol und 

 konzentrierter Schwefelsäure a) an dem ursprünglichen Harn, 

 b) an dem 3 bis 4 fach verdünnten Harn, c) unter allen Umständen 

 an dem sauren Destillat, wie schon Eppinger empfohlen hat, 

 auszuführen. (In diesem Falle ist man vor der störenden Beein- 

 flussung der Reaktion durch alle nicht flüchtigen Harnbestandteile, 

 namentlich die Harnfarbstoffe, geschützt.) Endlich wird direkt auf 



