Nachweis einiger Enzyme in dem Fruchtkörper der Lohblüte. 159 



Des weiteren gelang es auch, das Ferment noch etwas reiner 

 zu erhalten durch Ausfällen mit dem gleichen Volum absoluten 

 Alkohols und Aufschlämmeu des Rückstandes mit Wasser. 



Versuch 9. Es wurde, wie üblich, mit verdünnter Schwefelsäure ex- 

 trahiert; 120 ccm des ganz schwach opaleszierenden Filtrates wurden mit der 

 gleichen Menge absoluten Alkohols gefällt und sofort filtriert. Von dem 

 Niederschlag wurden etwa zwei Drittel in 30 ccm Wasser aufgeschlämmt, 

 worin, da Auswaschen unmöglich war und völliges Trocknen wegen Schwierig- 

 keit bei der Wiederauflösung vermieden wurde, natürlich noch Spuren von 

 Alkohol enthalten waren. 4 ccm dieser Aufschlämmung brachten 10 ccm 

 Milch (bei 30° C) in 3 Stunden 23 Minuten zum Gerinnen. Der Eest (etwa 

 ein Drittel des Niederschlags) wurde direkt mit 10 ccm Milch angerührt, 

 wobei nach 3 / 4 Stunden *) die Masse geronnen war. 



Versuch 10. Tmp. 40° C. Extraktion durch 12 Stunden mit verdünnter 

 Schwefelsäure. 90 ccm des fast klaren Filtrates mit 90 ccm Alkohol gefällt 

 und sofort abgesaugt. Etwa die Hälfte des Rückstandes mit 20 ccm Wasser 

 angerührt und davon: 1. 4 ccm mit 10 ccm Milch angesetzt: Gerinnung in 

 42 Minuten. (KontroUprobe mit gekochtem Extrakt 'nach 80 Minuten un- 

 verändert und selbst nach 48 Stunden, abgesehen von einem Rahmpfropf an 

 der Oberfläche, noch flüssig.) 2. 4 ccm mit 5 ccm Milch und 1 ccm Wasser: 

 Gerinnung in 30 Minuten. (Kontrolle wie oben bei 1.) Als weitere Kontroll- 

 proben wurden noch angesetzt: 3. 2 ccm des klaren Filtrates vor der 

 Alkoholfällung mit 5 ccm Milch: Gerinnung in 38 Minuten, und 4. 5 ccm 

 Milch mit 2 ccm Wasser : nach 123 Minuten unverändert, nach 48 Stunden 

 fest und sauer. 



Auch bei diesem Versuche dokumentierte sich, wie der Vergleich von 

 1 und 2 ergibt , das Zeitgesetz der Labung ; denn bei 1 enthielten 10 ccm 

 des Gemisches 2,83 ccm Aufschlämmung , das ergibt multipliziert mit der 

 Gerinnungszeit 118,86, und bei 2 — in 10 ccm 3,3 ccm Aufschlämmung mal 35 

 (Gerinnungszeit) — 116,75; Fehler etwa 2 Proz. 



Es gelang also das Ausfällen und Wiederauflösen des En- 

 zymes, allerdings unter ziemlicher Abschwächung der Wirksamkeit, 

 nämlich auf ein Drittel des ursprüngliches Wertes 2 ). 



Da bei einzelnen Versuchen (5 und 10) die Geriunung bei 

 Zusatz von aufgekochtem Extrakt selbst nach 24 bzw. 48 Stunden 

 nicht eintrat, während Milch mit Zusatz von reinem Wasser nach 

 derselben Zeit jedesmal fest war, kam ich zur Vermutung, es 

 könne ein kurzes Aufkochen vertragendes Antilab im Extrakt vor- 

 handen sein. Zur Prüfung dieser Annahme diente der folgende 

 Versuch : 



1 ) Wohl schon eher, doch wurde nicht früher nachgesehen. 



2 ) Die entsprechenden Zahlen (Enzymmenge X Gerinnungszeit) sind 

 3,8 für das unbehandelte Filtrat und 9 für die Alkoholfällungen, unter 

 entsprechender Berücksichtigung der Konzentrationsänderungen. 



