Untersuchungen über den Glykogenumsatz in der Kaninchenleber. 413 



wirken kann. Es ist denkbar, daß der Alkohol eine der Ferment- 

 wirkung entgegenstehende Hemmung beseitigt oder das Ferment 

 schädigt oder auch Bildung von neuem Enzym auslöst. In der 

 Tat haben wir in einigen nach dieser Richtung angestellten Ver- 

 suchen eine Beeinflussung der Fermenttätigkeit beobachtet. 



Wir haben daher folgende Versuchsanordnung vorgezogen. Ge- 

 wogene Quantitäten Leberbrei werden mit 0,8 proz. Kochsalzlösung 

 vier Stunden bei 37° C digeriert, und dann bestimmt man behufs 

 Ermittelung des Fermentgehaltes die Abnahme des Leberglykogens. 

 Wenn die Leber wenig oder kein Glykogen enthält, wird Glykogen 

 zugesetzt. Zum Vergleich dienen Proben von Leberbrei, die erst 

 gründlich aufgekocht und dann auf dieselbe Weise behandelt werden. 



Unsere Arbeitsmethode gestaltete sich danach folgendermaßen. Das 

 Kaninchen, welches gewöhnlich vorher Zucker bekommen hatte, wurde auf- 

 gebunden und narkotisiert, die Leber so schnell wie möglich herausgenommen, 

 augenblicklich mit körperwarmer Kochsalzlösung durchgespült, und nach der 

 Entfernung der Gallenblase, des Bindegewebes, eventuell auch blutig 

 tingierter Leberstückchen, gewogen und zerhackt. Yon dem Leberbrei 

 wurden zwei, eventuell mehrere Proben zu 25 g abgewogen und mit 25 ccm 

 Kochsalzlösung versetzt. Nach Aufkochen der Kontrollprobe wurden beide 

 Proben mit Toluol versetzt und gründlich durchschüttelt. Nach der Digestion 

 im Thermostaten wurde die Glykogenbestimmung nach einer modifizierten 

 Pf lüger sehen Methode 1 ) vorgenommen. 



Das Verfahren besteht darin , daß der Leberbrei in einem Becherglase 

 mit 50 ccm 60 proz. Kalilauge bis zur Lösung gekocht wird. Die Lösung 

 wird in einen Meßzylinder übergeführt und mit Wasser auf 150 ccm auf- 

 gefüllt. Mit einer Pipette werden 50 ccm in ein mit 50 ccm 96 proz. Alkohol 

 versetzten Zentrifugenröhrchen übergeführt. Man zentrifugiert, dekantiert 

 ab, löst den Bodensatz in 25 ccm 15 proz. KOH, setzt 50 ccm Alkohol hinzu 

 und zentrifugiert nochmals 2 ). Nach Dekantation wird der Bodensatz erst 

 mit Alkohol ausgewaschen (was ich jedoch später als überflüssig unterlassen 

 habe) und in 50 ccm Wasser gelöst. Man setzt ein Paar Tropfen Phenol- 

 phthalein hinzu, neutralisiert mit Salzsäure und setzt weiter davon bis zu 

 2,2 Proz. HCl hinzu, kocht drei Stunden im Wasserbade, verdünnt nach 

 Neutralisation mit 150 ccm und bestimmt das Glykogen als Zucker. 



In den meisten Versuchen wurde der Zucker nach Fehling-Soxhlet 

 bestimmt, in ziemlich zahlreichen Parallelversuchen nach einem neuen, von 

 mir 3 ) ausgearbeiteten Verfahren, welches viel genauere Bestimmungen zu- 

 läßt. Das Glykogen ist immer als Zucker berechnet. 



Bei dieser Methode werden folgende das Versuchsresultat eventuell be- 

 einflussende Momente eingeführt: 1. Die Exstirpation, welche jedoch an sich 



*) Bang, Über die Verwendung der Zentrifuge usw. Festschrift f. 

 Hammarsten. 



E ) Mit demselben Erfolg kann man anstatt in KOH den Bodensatz in 

 Wasser lösen. 



3 ) Bang, Zur Methodik der Zuckerbestimmung. Biochem. Zeitschr. 2. 



