Chemische Untersuchungen der lymphatischen Organe. 127 



als die vorhergehenden, sie enthielten nur Spuren von Nucleoproteid und 

 verhältnismäßig mehr nucleinsaures Histon. Das fünfte und das sechste 

 Extrakt waren nur wenig opaleszierend und enthielten nur kleine Mengen 

 von nucleinsaurem Histon, welches aber ziemlich rein war — 

 ein Beweis dafür, daß die mitzuteilende Darstellungsmethode nicht auf 

 der Spaltung einer präformierten komplizierteren Verbindung beruht. 



Nach 48 Stunden wurde die Lösung abgehebert und 1 Stunde 

 zentrifu giert. Die nachfolgende Filtration ging ganz rasch von statten, 

 das Filtrat hatte aber dasselbe opake Aussehen wie die ursprüngliche 

 Lösung. Nun versetzte ich die Flüssigkeit mit Chlorcalcium bis zu einem 

 Gehalt von 0,2 Proz., wobei ein voluminöser, weißer Niederschlag ausfiel. 

 In sehr konzentrierten Extrakten genügt nicht 0,2 Proz. zur quantitativen 

 Abscheidung. Ich erhöhte dann den Zusatz auf 0,3 Proz. CaCl 2 , was 

 stets ausreichte. 



Das Filtrat von diesem Niederschlag war gewöhnlich rötlich gefärbt 

 und etwas opaleszent. Chlorcalcium gab keine Fällung mehr, während 

 Essigsäure sofort eine solche hervorbrachte. Von dieser war oben schon 

 ausführlich die Rede. 



Die Chlorcalcium-Fällung kann auf zweierlei Weise in Lösung ge- 

 bracht werden, durch Zusatz von Ammoniak und von Neutralsalz- 

 lösungen. Das erstere Verfahren hat Huiskamp benutzt. Ich will 

 gern zugeben, daß man hierdurch eine weit vollständigere Lösung als 

 nach meinem Verfahren, der Kochsalzmethode, erzielt. Dagegen muß 

 ich meiner Methode insofern bei weitem den Vorzug geben, als sie eine 

 ganz vollständige Extraktion der histonhaltigen Verbindung gestattet, 

 während eine ganze Menge Verunreinigungen ungelöst zurückbleibt. 

 Nach meinem Verfahren erhält man daher eine farblose oder schwach 

 bläulich opaleszierende oder fluoreszierende Flüssigkeit, während Huis- 

 kamps Methode ein Filtrat liefert, das ebenso opak isf wie die ursprüng- 

 liche Lösung. 



Ist die Chlorcalcium-Fällung mit verdünnter Neutralsalzlösung er- 

 schöpft, so bleibt ein reichlicher bräunlich-weißer, sehr klebriger Rück- 

 stand, welcher kein Histon mehr enthält. Dieser Rest ist in verdünntem 

 Alkali löslich und kann dann aufs neue durch Essigsäure (und Chlor- 

 calcium) niedergeschlagen werden. Da sich das nucleinsaure Histon 

 schon mit 2-proz. Kochsalzlösung extrahieren läßt, wird man wohl kaum 

 annehmen wollen, daß hierdurch eine Spaltung einer mehr komplizierten 

 Histonverbindung stattgefunden hat, was übrigens auch durch die 

 Reaktionen, die später besprochen werden sollen, ausgeschlossen erscheint. 



Ich glaube deshalb aus guten Gründen meiner Methode den Vorzug 

 geben zu müssen und habe mich ihrer bei der Untersuchung des nuclein- 

 sauren Histons ausschließlich bedient. 



Versuchsweise habe ich auch die Darstellungsmethode Malengreaus 

 angewendet. Das Filtrat von dem durch Halbsättigung mit Ammon- 

 sulfat im Wasserextrakte der Thymus erzeugten Niederschlag ist, wie 

 schon bemerkt, ganz wasserklar. Es wurde dialysiert, mit 15 Volumen 

 Wasser verdünnt und mit Essigsäure gefällt und der Niederschlag in 

 500 ccm l%o NaOH zu einer neutral reagierenden Lösung gelöst. Eine 

 Probe gab bei Halbsättigung mit Ammonsulfat einen spärlichen Nieder- 

 schlag. — Bei Sättigung mit Kochsalz trat die Histon-Fällung ein, und 

 im Filtrat ließ sich die Nucleinsaure auf gewöhnliche Weise nachweisen. 



