Über die Wirkungsweise des Trypsins. 161 



E. Grimaux*) fand 1882, daß die Seh aal sehen Aspartide in 

 Kali gelöst und mit wenig Kupfersulfat versetzt, die sog. Biuret- 

 reaktion geben. Da nun nach Schiff die Polyaspartide mit Kali 

 die Salze der entsprechenden Aspartsäuren bilden, so kommt die 

 Biuretreaktion diesen letzteren zu. 



Nach Vorschrift Schiffs stellte ich mir ein Präparat des 

 Oktaspartid durch Erhitzen im Autoklaven her. Die Biuretreaktion, 

 die das Präparat zeigte, war aber zu gering, um, allein auf das 

 Verschwinden derselben gestützt, die Frage zu beantworten, ob 

 eine Spaltung eingetreten sei. (An einem von Prof. Schiff mir 

 gütigst überlassenen Präparate wurde auch diese zum Maßstabe 

 genommen.) Nun aber gibt das Oktaspartid, mit Kupferkarbonat 

 gekocht, kein Kupfersalz, während Asparaginsäure, in die ja die 

 Polyaspartsäuren gespalten werden mußten, ein charakteristisches 

 Kupfersalz liefert. 



Versuch 1. 



0,5 g Oktaspartid wurden mit 15 com einer Trypsinlösung ß unter 

 Toluol in den Brutschrank gebracht. Nach 4 Wochen wurde das Ge- 

 löste vom Ungelösten abfiltriert, vom Toluol befreit und mit Kupfer- 

 karbonat gekocht, filtriert, eingeengt und erkalten gelassen. Es scheiden 

 sich keine Kristalle ab. 



Versuch 2. 



Dieselbe Anordnung wie bei 1, mit demselben negativen Resultate. 



Auch eine Versuchsreihe mit Pepsin - Salzsäure lieferte ein nega- 

 tives Resultat. 



Bei Versuchen mit ausgesprochen die Biuretreaktion gebenden 

 Körpern suchte ich eine eingetretene Spaltung der betreffenden 

 Körper dadurch nachzuweisen, daß ich ermittelte, ob die Biuret- 

 reaktion verschwunden sei oder nicht. Es wurden etwa 0,1 bis 0,3 g 

 Substanz mit 5 cem Trypsin B versetzt und zur Kontrolle dieselbe 

 Substanzmenge mit 5 cem abgetöteter Trypsinlösung der Digestion 

 überlassen. Die Prüfung auf Vorhandensein der Biuretreaktion 

 wurde möglichst quantitativ gemacht, um vergleichbare Versuchs- 

 resultate zu erhalten: Es wurden zu genau 1 cem der Lösung in 

 der Regel 3 Tropfen Natronlauge und 1 bis 2 Tropfen verdünnter 

 Kupfersulfatlösung zugesetzt. 



9. Biuret. 

 Gulewitsch**) hat bereits angegeben, daß die Biuretreaktion 

 des mit Trypsin digerierten Biurets selbst bei dreimonatlicher 

 Digestion nicht verschwindet. Bei meinen Versuchen, in denen 



*) Bull. soc. chim. 38, 69 (1882). 

 **) Zeitschr. f. physiolog. Chemie 27, 551. 

 Beitr. z. ehem. l'hy.-siolo^ie. IV. 11 



