Über das Verhalten des genuinen Serums usw. 283 



Eiweifä erhalten wurde, und benutzten die Bestimmung des Stick- 

 stoffgehaltes im Filtrat als Kontrolle. 



Daf3 auch dieses Verfahren nicht allen Anforderungen genügt, 

 liegt auf der Hand; immerhin schien es uns für diesen Zweck 

 am geeignetsten, zumal die Genauigkeit der Kjeldahlschen 

 Stickstoffbestimmung die Auffindung sehr geringer Unterschiede 

 gestattet. 



Im Detail wurden die Bestimmungen in folgender Weise 



durchgeführt : 



Zu den Versuchen wurde durchweg Pferdeserum benutzt, das aus 

 frischem, defibriniertem Pferdeblut dargestellt war und mit einigen Tropfen 

 Chloroform in fest verschlossener Flasche aufgehoben wurde. Das zur 

 Verwendung gelangende Serum war nie älter als vier Wochen, auch stets 

 nur schwach hämoglobinhaltig. Bei den ersten Versuchen wurden die 

 Serummengen mit der Pipette direkt abgemessen, später wurde zur Er- 

 zielung genauerer Resultate das Serum vorher mit der vier- bis fünffachen 

 Menge physiologischer Kochsalzlösung verdünnt. Es wurde von jeder 

 neuen Serumportion Gesamtstickstoff, koagulabler und Filtratstickstoff be- 

 stimmt, letzterer entsprechend bei der Berechnung in Abzug gebracht, 

 da es sich nur um die Abnahme des genuinen, also koagulablen Eiweißes 

 handelte. — Die Fermentmengen wurden so abgemessen, daß kurz vor 

 dem Ansetzen einer Versuchsreihe etwa 10 bis 15 g Trypsin*) in un- 

 gefähr 500 ccm physiologischer Kochsalzlösung zu einer feinen Emulsion 

 gelöst und mit wenig Toluol versetzt, alsdann mit der Pipette, nachdem 

 die Lösung jedesmal gut durchgeschüttelt war, die gewünschten Mengen 

 entnommen wurden. Als Einheit (Trypsinmenge I) galten meist 10 ccm, 

 manchmal 5 ccm dieser Lösung. Es wurde hier ebenfalls der Gesamt- 

 stickstoffgehalt dieser Trypsinlösung, ferner der Anteil an koagulablem 

 und nicht koagulablem Stickstoff ermittelt und bei der Berechnung der 

 Analysen in Abzug gebracht. Großes Gewicht wurde darauf gelegt, die 

 Konzentration an Eiweiß und an Elektrolyten in den einzelnen Proben 

 jeder Versuchsreihe genau gleich zu machen. Es wurden stets erst 

 100 ccm einer lOproz. Na 2 C0 8 -Lösung zugegeben und schließlich die 

 Lösung mit aq. isot. auf 100 ccm, bei einigen Versuchsreihen auf 150 ccm, 

 aufgefüllt. Doch fand, um die Lösungen zu gleicher Zeit ansetzen zu 

 können, der Zusatz des Ferments zu allerletzt statt, nachdem vorher in 

 entsprechender Weise bei jeder Probe Sodalösung und physiologische 

 Kochsalzlösung dem Serum zugesetzt war. Die gut durchgeschüttelten 

 Proben wurden mit wenig Chloroform und Toluol — möglichst gleichen 

 Mengen bei allen Proben — konserviert. Als Anfangszeit galt 1 / 4: Stunde 

 nach dem Einsetzen in den Brutschrank, um die Lösungen vorzuwärmen. 

 Das Unterbrechen der Verdauung fand durch tropfenweises Ansäuern mit 

 einer ganz schwachen (2proz.) Essigsäure und sofortiges Erhitzen im 

 Wasserbade bis zur flockigen Koagulation statt. Der möglichst gut aus- 

 gewaschene Niederschlag und das Filtrat nach dem Ansäuern mit Schwefel- 

 säure und Eindampfen wurden nach Kjeldahl verbrannt. Die Angaben 

 der verdauten Mengen sind entweder in Prozenten des genuin vorhanden 

 gewesenen, also anfangs koagulablen Serums oder in mg Stickstoff ge- 



*) „Pankreatin" der Rhenania, ein recht wirksames Präparat. 



